Etude de la regulation du gene codant pour l'actine alpha cardiaque chez la souris

A contribution to understanding the regulation of the alpha cardiac actin gene in the mouse

• Auteur / Autrice : CHRISTINE BIBEN
• Direction : François Lacroute
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Partant de l'etude d'une souris porteuse d'une mutation affectant le locus de l'actine alpha cardiaque, nous avons suppose l'existence d'elements distaux necessaires a la regulation de ce gene. La recherche de sites d'hypersensibilite a la dnase i nous a permis de localiser deux elements regulateurs, l'un a 5 kb (proximal), l'autre a 7 kb (distal) en amont du site d'initiation. Tous deux sont capables d'activer la transcription d'un promoteur heterologue et ce, dans les myotubes seulement. Ce sont donc des enhancers specifiques du muscle dans les systemes en culture. L'effet de l'enhancer distal est de loin le plus fort, qui augmente 70 fois l'activite du promoteur heterologue teste (tk) et 170 fois celle de son propre promoteur. Nous avons sequence cet element dont les positions (7. 8/7. 0kb) et qualite etaient bien correlees avec l'effet deletere de la mutation sur la transcription du gene. Cet enhancer contient plusieurs motifs souvent associes aux activateurs transcriptionnels des genes musculaires, tels les boites e, cibles des facteurs myogeniques hlh et des sequences riches en a/t. Mais, les premieres experiences de transactivation par ces facteurs de transcription montrent que l'activite de ce fragment dans les cellules en culture n'est pas due a leur presence. Un transgene contenant la sequence codante de la beta galactosidase sous le controle de cet element, introduit dans des souris transgeniques, confere une forte expression de cette enzyme aux muscles stries squelettique et cardiaque, confirmant que cet element est probablement implique dans l'activite transcriptionnelle du gene in vivo