Maturation proteolytique post-traductionnelle de precurseurs d'hormones peptidiques : importance fonctionnelle de la structure en beta-turn et de certains residus au voisinage des sites de clivage

Post-ranslational proteolytic processing of peptide hormone precursors: importance of beta-turn and of given residues at or near the cleavage sites

• Auteur / Autrice : NOUREDDINE BRAKCH
• Direction : Paul Cohen
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

La maturation proteolytique selective de pro-proteines retrovirales et des precurseurs de peptides et de recepteurs hormonaux au niveau de sites constitues par des residus d'acides amines basiques met en jeu des mecanismes enzymatiques encore peu etudies a ce jour. Nous avons choisi pour etudier in vitro les parametres de l'action enzymatique d'une endoprotease de conversion (appelee pro-ocytocine-neurophysine) une serie de 60 peptides reproduisant ou mimant la sequence de la proforme au voisinage du doublet de clivage (lys-arg). Les resultats nous permettent de deduire que: 1) l'integrite du doublet basique est necessaire; 2) la reactivite des paires de doublets depend de la nature de celui-ci et de ses interactions avec les sequences adjacentes; 3) le doublet basique est localise au voisinage d'une structure en beta-turn; 4) cette structure joue un role fonctionnel dans la maturation proteolytique; 5) l'exposition du doublet basique est primordiale; 6) l'acide amine en aval (p1) du doublet basique presente des caracteristiques correspondant a l'image d'un sous site enzymatique (s1). Par ailleurs, nous avons developpe une approche cellulaire qui a consiste a analyser la maturation de la pro-somatostatine native, ou apres mutagenese selective sur certains residus, ou segments, de la proforme dans des cellules de neuroblastome (neuro 2a). Celle-ci nous a permis de demontrer que les residus proline en plus de leur participation a une structure en beta-turns, grace a leur emplacement en des positions cle de la region pro du precurseur jouent un role primordial dans le maintien de l'architecture des sites de reconnaissance (un monobasique, arg et un dibasique arg-lys) par les enzymes de maturation. Les resultats de ces etudes fournissent un ensemble de donnees nous permettant d'envisager la modelisation, et la synthese, d'un inhibiteur specifique de la pro-ocytocine/neurophysine convertase en particulier, ou des convertases, en general, qui constituerait un outil pour completer l'etude de cette endoprotease et permettre peut-etre des applications therapeutiques importantes dans le domaine des pathologies mettant en uvre des dereglements neurohormonaux