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Thèse soutenue

Cryoconservation d'apex preleves sur des vitroplants de palmier dattier (phoenix dactylifera l. ). Mise au point du protocole et etude histo-cytologique des echantillons au cours de la congelation et de la remise en culture

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Auteur / Autrice : SOPHIE BAGNIOL
Direction : Florent Engelmann
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1992
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Le protocole de cryoconservation suivant a ete mis au point sur des apex de vitroplant de palmier dattier: culture de 24 h sur milieu standard (0,1 m de saccharose), pretraitement de 24 h sur milieu enrichi en saccharose (o,5 m), traitement cryoprotecteur de 2 h a 0c en milieu liquide contenant 10% de dmso et 0,5 m de saccharose, refroidissement lent a 1c/mn jusqu'a 30c, immersion dans l'azote liquide, rechauffement rapide a +40c. La remise en culture est effectuee pendant 10 jours a l'obscurite puis en lumiere attenuee sur un milieu solide contenant du charbon actif (1 g/1). Des taux de reprise de 43,3%, 12,9% et 50,3% ont ete respectivement observes pour les varietes bou sthammi noir, zahidi et nabut seif. L'etude histo-cytologique des apex au cours de ce protocole a montre le role important de l'amidon, celui-ci etant synthetise des la culture sur le milieu standard. Seuls certains groupes de cellules resistent a la congelation; le plus souvent des cellules meristematiques localisees dans des zones superficielles. Les apex conservent leur structure initiale jusqu'au septieme jour apres le rechauffement. Au-dela, la proliferation importante des cellules s'organise en une structure a deux zones: une zone externe de cellules meristematiques entourant une zone interne de cellules differenciees, riches en amidon. La regeneration d'une pousse feuillee est observee apres trois mois de remise en culture