Recherche Avancée

Thèse soutenue

Étude des mécanismes de contrôle et de régulation de l'endocytose chez Dictyostelium discoideum

FR  |  
EN
Auteur / Autrice : Françoise Brenot
Direction : Michel Satre
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie
Date : Soutenance en 1992
Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre d'études nucléaires (Grenoble ; 1956-2006)

Résumé

FR

Ce travail a consiste en l'isolement de souches mutantes de l'amibe dictyostelium discoideum ax2 affectees dans l'endocytose et en leur caracterisation afin d'analyser les mecanismes de regulation impliques dans ce processus. Quinze mutants de dictyostelium ont ete obtenus par une selection basee sur leur resistance a la toxicite du methylene diphosphonate, qui penetre dans les amibes uniquement par pinocytose de phase fluide. Trois de ces mutants, etudies plus en detail, sont caracterises par une vitesse d'entree du marqueur de phase fluide et un volume apparent endocyte reduits de moitie par rapport a la souche ax2 ainsi qu'un contenu plus faible en enzymes lysosomales. La rmn du #3#1p revele la presence d'un compartiment endosomal precoce de ph acide (ph 4,3), suivi d'un compartiment tardif plus alcalin (ph 5,8-6,0) chez la souche ax2. Ce compartiment acide precoce est absent chez les 3 mutants. Le phenotype mutant est systematiquement associe a une deficience de l'acidification. Le fonctionnement subcellulaire a permis d'isoler des vesicules (acidosomes) caracterisees par la presence d'une atpase vacuolaire sensible a des concentrations faibles de nbd et de bafilomycine. Ces acidosomes sont depourvus de marqueurs de pinocytose comme d'enzymes lysosomales mais apparaissent comme des organites specialises dans l'acidification precoce des compartiments endocytaires par association transitoire avec les endosomes. Les acidosomes des 3 mutants montrent une reduction de l'activite atpasique vacuolaire et une diminution de la capacite d'acidification intravesiculaire qui est sensible a la presence des ions chlorures dans le milieu