Analyses structurales de proteines et de complexes de coordination par spectrometrie de masse

Structural analysis of proteins and coordination compounds by mass spectrometry

• Auteur / Autrice : Francis Bitsch
• Direction : Alain Van Dorsselaer
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Le but de notre these a ete de developper des methodes et de strategies d'analyses structurales de peptides, de proteines et de complexes de coordination par spectrometrie de masse. L'etude des massifs isotopiques nous a permis de determiner les conditions d'utilisation des mesures de masse monoisotopiques et moyennes. Nous avons etudie dans quelles conditions ces mesures permettaient de mettre en evidence des modifications couramment rencontrees sur des proteines. L'interpretation des fragmentations des ions peptidiques en lsims nous a permis d'obtenir des informations de sequence peptidique sur des variants de l'hirudine recombinante ainsi que sur des peptides de coupures de la protamine sp de seiche. L'etude de la fragmentations des liaisons disulfures en lsims nous ont permis de proposer une nouvelle strategie dans l'attribution des ponts disulfures; celle-ci a ete appliquee a la determination des ponts disulfures de la defensine a naturelle et recombinante. Nous avons applique l'ionisation par electrospray (es-ms) a la caracterisation de peptides et de proteines intactes, naturelles ou produites par la synthese chimique ou le genie genetique. L'utilisation de la fab-ms et de l'es-ms nous a permis d'elucider les structures de complexes de coordination macromoleculaires (cartenates) pour lesquels la caracterisation est difficile par les methodes actuelles d'analyse (r. M. N. )