Contribution a l'etude d'un gene codant pour la glutamate synthase dependante de la ferredoxine chez nicotiana tabacum l

Contribution to the study of expression of a gene coding for ferredoxin-dependent glutamate synthase in nicotiana tabacum l

• Auteur / Autrice : CLAIRE BRUN ZEHNACKER
• Direction : Jean-François Morot-Gaudry
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

La glutamate synthase dependante de la ferredoxine (fd-gogat) a ete purifiee a partir de feuilles de tabac (nicotiana tabacum l. ), et ses proprietes cinetiques et biochimiques ont ete etudiees. Des anticorps polyclonaux ont ete prepares contre la proteine purifiee, et ont permis l'etude immunologique de l'enzyme. Ces anticorps ont ete utilises pour isoler a partir d'une banque d'expression, un adnc partiel (0,5 kb) de l'arnm codant pour la fd-gogat. Cet adnc a permis de cribler par la suite une banque construite dans gt10 et d'isoler un clone plus long de 3,4 kb. Il a ete cartographie et sequence. La structure primaire (991 acides amines) de la proteine a ete comparee avec celles de la fd-gogat de mais et de la nadph-gogat (grande sous-unite) de e. Coli. L'enzyme possede egalement des homologies de sequence avec une autre flavoproteine, la flavocytochrome b#2 de levure. Comme les autres enzymes du metabolisme azote, l'expression du (des) gene(s) et l'activite de la fd-gogat sont regulees par la lumiere. Au cours du verdissement des feuilles de tabac, l'activite enzymatique est multipliee par 3, et cette augmentation reflete une augmentation des quantites d'arnm et de proteine