La myristylation de la proteine de capside vp4 du poliovirus; son role dans le cycle viral

Myristlation of poliovirus capsid protein vp3: its role in the viral cycle

• Auteur / Autrice : Daniel Marc
• Direction : Sylvie Van der Werf
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés libres

Site directed mutagenesis

Résumé

La proteine de capside vp4 du poliovirus, ainsi que des precurseurs vp0 et p1, est myristlee: sa glycine n-terminale est liee de maniere covalente a un acide gras tetra-decanoique. Cette modification co-traductionnelle est determinee par la sequence n-terminale de la proteine (gly#1ala#2gln#3val#4ser#5ser#6). Par mutagenese dirigee a l'aide d'oligonucleotides, nous avons modifie dans le cadn viral la sequence codant pour le signal de myristylation de la proteine. Des transcrits genomiques portant les differentes mutations ont ete synthetises in vitro, et leurs proprietes analysees in vitro par traduction en systeme acellulaire, et in vivo apres transfection de cellules de primates. La transfection du transcrit portant la mutation ser#5thr conduit a une production de virus possedant une proteine normalement myristylee. Toutes les autres mutations qui empechent totalement (gly#1arg et gly#1ala) ou partiellement (ser#5pro et ala#2pro) la myristylation de la proteine vp0 in vivo, abolissent l'infectivite des transcrits. Ces dernieres mutations n'empechent pas la replication des transcrits in vivo, mais affectent la maturation proteolytique du precurseur p1 in vitro. En outre, dans le cas des mutations de la glycine no 1, l'assemblage viral n'a pas lieu, le defaut se situant au niveau de l'assemblage des pentameres 14s. Dans le cas des deux autres mutations (ser#5pro et ala#2pro), des particules virales matures s'assemblent en quantite reduite, mais ces virons ne sont pas infectieux et semblent defectueux dans les etapes precoces de l'infection. La myristylation de la proteine vp4 et de ses precurseurs est donc indispensable au cycle viral. Elle joue role important au niveau de l'assemblage viral, mais semble egalement impliquee dans les etapes precoces de la decapsidation