Regulation de l'expression des genes codant pour l'interleukine 2 et ses recepteurs : effets d'un immunomodulateur, la cyclosporine a; role des proteines nfkappab et de kbf1 dans la regulation de la transcription

• Auteur / Autrice : Agnès Hémar
• Direction : Gérard Buttin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

L'interleukine 2 (il2) est un facteur de croissance synthetise par les lymphocytes t auxiliaires actives. Elle exerce son effet biologique en se fixant sur des recepteurs membranaires de haute affinite. Ces recepteurs sont compose d'au moins deux chaines polypeptidiques: il2r (p55) et il2r (p70). L'expression de la chaine est tres finement regulee. On ne la trouve a la surface des cellules du systeme lymphoide que lorsqu'elles sont activees. Nous avons etudie la regulation de l'expression des genes de l'il2 et de la chaine de son recepteur au niveau de leur transcription et la modulation de cette expression par un immunosuppresseur, la cyclosporine a. Le modele experimental utilise est une lignee de cellules t humaines, iarc 301, qui exprime ces genes de facon constitutive et que nous avons comparee a la lignee jurkat. La lignee iarc 301 est autocrine pour l'il2, c'est-a-dire que l'il2 qu'elle synthetise est necessaire a sa croissance. Nous avons montre la presence constitutive dans le noyau de iarc 301, du facteur de transcription nfb. Cette proteine est necessaire a l'expression constitutive de l'il2 et de la chaine de son recepteur. Nfb est retenu dans le cytoplasme des cellules quiescentes, associe a une proteine inhibitrice ib. L'activation de ces cellules conduit a la liberation de nfb et a sa translocation dans le noyau. La proteine kbf1 est la sous-unite de nfb qui lie l'adn. Elle se fixe sur les memes sequences d'adn que nfb, mais avec une affinite differente de nfb. Les promoteurs de plusieurs genes contiennent des elements regulateurs reconnus par ces proteines mais avec des affinites differentes selon leur sequence. Nous avons montre que kbf1, en l'absence de nfb ne pouvait pas activer la transcription d'un gene. A partir de nos resultats et de ce qui est connu sur ces deux facteurs nous proposons un modele de regulation dans lequel kbf1 serait un inhibiteur competitif de nfb. Sachant que l'expression de kbf1 est tres augmentee dans les cellules apres leur activation, ceci permettrait de comprendre comment l'expression des genes qui sont sous le controle de ces proteines, d'une part n'est pas simultanee et d'autre part peut etre transitoire. Bien que les genes de l'il2 et de l'il2r soient exprimes de facon constitutive chez iarc301, leur transcription peut etre modulee. Ainsi l'immunosuppresseur cyclosporine a peut inhiber la synthese constitutive de l'il2 conduisant a la mort de ces cellules tumorales. La cyclosporine inhibe egalement la transcription du gene de l'il2r mais son effet met tres longtemps avant de se repercuter au niveau de l'expression de la proteine a la surface des cellules, en raison de la demie-vie tres longue de la proteine. Ceci peut rendre compte de bon nombre des contradictions que l'on retrouve dans la litterature concernant l'effet de la cyclosporine a sur les recepteurs de l'il2. Nos resultats impliquent aussi que, contrairement a la chaine , la chaine doit recycler vers la membrane plasmique apres avoir ete internalisee dans des compartiments intracellulaires d'endocytose