Etude de cytochromes p-450 exprimes dans la levure s. Cerevisae

Studies of cytochromes p-450 expressed in yeast s. Cerevisiae

• Auteur / Autrice : Christophe Cullin
• Direction : Denis Pompon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Les cytochromes p-450 sont des proteines de premiere importance dans un grand nombre de processus de detoxication et de cancerogenese chimique. Dans la majorite des cas, ces enzymes sont ancrees dans la membrane du reticulum endoplasmique. Pour etudier ces proteines, nous avons developpe un systeme d'expression heterologue d'adnc dans la levure s. Cerevisiae. Ce systeme nous a permis d'etudier les isoformes ia1 et ia2 murines. Ces enzymes exprimees dans la levure se sont averees en tout points identiques a ce que nous pouvions en attendre. A partir de ces deux adnc, nous avons construit un ensemble de genes hybrides ia1 et ia2. L'expression dans la levure de ces genes a mis en evidence qu'une partie limitee de la sequence primaire de ces isoformes controlait les activites de 3-hydroxylation du benzo(a)pyrene et de depenthylation de la penthoxy-resorufine. La creation en 5 de la sequence codante de deletions a permis de montrer que le cytochrome p-450 ia1 murin exprime dans la levure pouvait etre ancre de facon fonctionnelle sans sa presequence. La meme zone que celle decrite precedemment pour le controle d'activites enzymatiques peut etre responsable de cet ancrage. Enfin, l'expression dans la levure s. Cerevisiae des isoformes humaines nf25, pcn1, et pcn3 nous a permis de montrer que les proteines correspondantes etaient tres semblables entre elles. Celles-ci ne peuvent donc a priori pas expliquer moleculairement le polymorphisme demontre dans le metabolisme de medicaments gomme la nifedipine