Recherche Avancée

Thèse soutenue

Expression fonctionnelle du mécanisme de libération autocatalytique du calcium intracellulaire dans l'ovocyte de Xénope suite à l'injection d'ARN messagers de cerveau embryonnaire de Cobaye : facilitation par activation d'un récepteur purinergique exogène

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Auteur / Autrice : Franck Fournier
Direction : Pierre Guilbault
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
Date : Soutenance en 1991
Etablissement(s) : Lille 1

Résumé

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L'ovocyte de Xénope immature a été utilisé à la fois comme vecteur d'expression d'ARN messagers et comme modèle de détection et d'étude des principaux mécanismes intervenant dans la modification du calcium calcium libre intracytosolyque. En particulier, nos résultats ont permis de mettre en évidence l'expression, à partir d'ARNm de cerveau de cobaye, d'un phénomène de libération autocatalytique de calcium à partir de réserves intracellulaires (phénomène de calcium induced calcium release: CICR). Ce système de mobilisation du Ca est stimulé par l'entrée de Ca s'effectuant par les canaux calciques exogènes voltage dépendants et se comporte donc comme un relai amplificateur entraînant une augmentation importante et transitoire de la concentration de Ca. En outre, nos résultats amènent à conclure que l'expression de ce mécanisme de CICR n'est effective qu'à partir d'ARNm de cerveau ou de cœur de cobaye. Par ailleurs, d'autres types de préparations (muscle squelettique de crustacé et myomètre de ratte gestante), engendrant pourtant l'expression de canaux calciques dans l'ovocyte, ne permettent en aucun cas de visualiser la présence d'un tel mécanisme suggérant ainsi une certaine hétérogénéité dans la répartition tissulaire de ce mécanisme. Dans un deuxième temps, il est démontré que l'activation d'un récepteur purinergique de type P2Y, couplé à la phospholipase C et occasionnant une production accrue d'Insp3 et de diacylglycérol, entraîne une sensibilisation du mécanisme de CICR exogène. Cette facilitation semble s'efectuer par une potentialisation de l'influx calcique (facteur déclenchant) et ceci grâce à la phosphorylation des canaux calciques induite suite à l'activation de la protéine kinase C. Cette idée est renforcée par le fait que d'autres types de récepteurs métabotropiques transplantés (R. Glutamate et ACH), connus pour stimuler également le courant entrant de Ca exogène grâce à l'activation de la pKC, induisent lorsqu'ils sont sollicités par leurs agonistes respectifs, des réponses imilaires à celle du récepteur purinergique (sensibilisation du CICR). Il est proposé finalement que ces différentes entités protéiques exprimées dans l'ovocyte (mécanisme de CICR, récepteur purinerigque, canaux calciques) pourraient constituer, in situ un système cellulaire intégré participant notamment à la stimulation de la libération de neurotransmetteurs; ce qui permettrait d'augmenter l'efficactié synaptique au niveau central