Recherche Avancée

Thèse soutenue

Contributions à l'amélioration de la Carotte (Daucus carota l. ) en vue d'augmenter sa richesse en carotènes et en fibres alimentaires : variabilité somaclonale et transformation génétique par agrobacterium tumefaciens

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Auteur / Autrice : Nathalie Jullian-Pawlicki
Direction : Brigitte S. Sangwan-Norreel
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Génie Enzymatique, Bioconversion et Microbiologie
Date : Soutenance en 1991
Etablissement(s) : Compiègne
Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences pour l'ingénieur (Compiègne)

Résumé

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Afin de rechercher des plantes de carotte plus riches en carotènes et en fibre alimentaires, l'embryogenèse somatique est optimisée chez 14 variétés. Les teneurs en carotènes et en acide galacturonique dans les pivots de plantes régénérées a partir d'embryons somatiques sont analysées et comparées a celles de plantes issues de semis. Pour 6 variétés sur les 9 étudiées, des plantes surproductrices en carotènes sont obtenues. En revanche, aucune variation n'est observée pour les teneurs en acide galacturonique. Le rôle de l'embryogenèse somatique comme une source de variabilités est discute. Pour provoquer des mutations, des germinations stériles sont irradiées (rayons gamma). Les teneurs en carotènes des quelques plantes régénérées a partir d'embryons somatiques ne montrent pas de différences significatives avec celles des plantes témoins non irradiées. De plus, après une dose d'irradiation de 5000 rads, des cals hyperpigmentés sont observes. Aussi, dans un but d'introduire plusieurs gènes modifiant le métabolisme des carotènes chez la carotte, les conditions optimales pour la transformation génétique par agrobacterium tumefaciens sont définies. Il apparait que les fragments de pétioles, prélèves sur des germinations stériles âgées de 3 ou 4 semaines, sont les explants les plus favorables a la transformation. Une coculture de 48 ou 72h est la durée la plus adéquate. Une préculture des explants avant la coculture, ainsi que l'addition de composes phénoliques, comme l'acetosyringone, ne sont pas primordiaux. Différents tests ont confirme l'état transgénique des plantes.