Organisation et expression du génome mitochondrial des plantes supérieures : structure des gènes ''editing'' des ARNs et séquence protéique directe de la sous-unité 9 de l'ATPase mitichondriale de blé : études in vivo et in vitro

Organization and expression of plant mitochondrial genome : genes structure, RNA editing and direct protein sequence of ATPase subunit 9 : in vivo and in vitro studies

• Auteur / Autrice : Dominique Bégu
• Direction : Simon Litvak
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Bordeaux 2

Résumé

Dans le genome mitochondrial de ble, le gene atp9 codant pour la sous-unite 9 de l'atpsynthase (atpase) est present sous forme de deux copies etroitement associees au gene atpa codant pour la sous-unite alpha de l'atpase. Ces genes sont cotranscrits et le profil de transcription est conserve dans les lignees de ble isoplasmique fertile, alloplasmique smc et a ferilite restauree. L'analyse de sequence des genes atp9 et des adnc des transcrits dans les differentes lignees a montre que la region codante est majoritairement modifiee par huit conversions de c en u entrainant le changement de 5 acides amines et la creation d'un codon stop premature; deux des conversions n'entrainent pas de changements dans la proteine. Le sequencage direct et l'analyse de la composition en acides amines de la sous-unite 9 de l'atpase de ble fertile a permis de confirmer pour la premiere fois ces evenements de rna editing au niveau de la traduction. Ce processus de modification post-transcriptionnelle des arns messagers appele rna editing qui consiste en des conversions de c en u dans la region codante a ete recemment decrit dans la mitochondrie des plantes. Des molecules partiellement editees du cote 3 et/ou du cote 5 de l'arn, pouvant constituer des intermediaires de rna editing, ont ete isolees dans les mitochondries de ble smc: ces observations suggerent un mecanisme post-transcriptionnel de rna editing progressant de facon continue et orientee dans l'arn. L'incubation d'arns non edites du gene atp9 dans un extrait proteique de mitochondrie de ble a permis d'obtenir des molecules correctement editees identiques a celles observees in vivo. L'activite de rna editing est sensible a la chaleur et aux proteases. Elle est inhibee par un pretraitement de l'extrait a la nuclease micrococcale, ce qui indiquerait que la reaction enzymatique necessite l'intervention d'un ou de plusieurs acides nucleiques