Etude de la voie de biosynthèse de threonine chez Pseudomonas aeruginosa

Threonine biosynthesis pathway in Pseudomonas aeruginosa

• Auteur / Autrice : Christian Clepet
• Direction : Jean-Claude Patte
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et microbiologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences

Résumé

La biosynthese de la threonine est obtenue a partir de l'aspartate semialdehyde, par une serie de trois etapes enzymatiques catalysees par l'homoserine deshydrogenase (hom), l'homoserine kinase (thrb) et la threonine synthase (thrc). Un fragment d'adn de pseudomonas aeruginosa (souche pao) a ete isole, qui complemente divers alleles thrb chez e. Coli. Cet insert codant pour une homoserine kinase (hk1) de 34 kda a ete sequence. Contrairement aux cas de hom et de thrc (voir ci dessous), il n'existe aucune homologie entre hk1 et les proteines thrb decrites. Par genetique inverse, une mutation hkl a ete introduite chez p. Aeruginosa. La souche selectionnee est restee prototrophe. Un modele impliquant deux proteines a activite homoserine kinase peut donc etre envisage chez p. Aeruginosa (ce qui serait une situation originale). A partir de l'adn genomique du mutant hkl, un 2eme fragment a ete isole par complementation des mutants thrb d'e. Coli. La sequence du gene hk2 responsable de cette complementation a ete determinee. De meme que pour hk1, aucune homologie n'a pu etre observee entre la sequence hk2 et les proteines thrb. Les genes hom et thrc de p. Aeruginosa isoles sur un cosmide recombinant, ont ete sequences. La proximite etroite de ces deux genes suggere l'existence d'un operon hom-thrc. Contrairement a e. Coli, l'expression du gene hom n'apparait pas regulee. Les sequences deduites hom et thrc ont ete comparees aux sequences correspondantes des enzymes d'escherichia coli, bacillus subtilis, corynebacterium glutamicum et saccharomyces cerevisiae. Des homologies significatives ont ete observees, permettant de tirer des conclusions sur la structure et sur l'origine evolutive possible de ces proteines. L'organisation genetique globale hom-thrc----thrb n'a encore jamais ete decrite chez d'autres especes