Production de lipases fongiques spécifiques : étude par fluorimétrie
Auteur / Autrice : | Thierry de Laborde de Monpezat |
Direction : | Michel Sancholle |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Biologie et technologie végétale |
Date : | Soutenance en 1990 |
Etablissement(s) : | Toulouse 3 |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Résumé
Les lipases catalysent l'hydrolyse des triglycerides en glycerol et acides gras. Elles presentent plusieurs types de specificite. Afin d'etudier la specificite de la nature des acides gras, nous avons mis au point une methode de dosage de l'activite lipasique utilisant la lipase de rhizopus delemar. Pour cela, sept esters de l'umbelliferone ont ete synthetises. Les conditions optimales d'hydrolyse ont ete etablies. Cette methode presente une sensibilite importante. Pour controler sa fiabilite, des dosages ont ete effectues apartir de deux champignons connus pour produire des lipases. L'hydrolyse des divers esters a permis de determiner des specificites comparables a celles citees dans la litterature. Puis, un test sur boites de petri a ete mis au point pour rechercher des souches productrices de lipases specifiques. Les esters sont incorpores dans le milieu de culture et les resultats ont permis de classer les souches en fonction du type de specificite des lipases produites. Botrytis cinerea a ete selectionne pour ses lipases specifiques des acides gras insatures. Cette enzyme produite en culture liquide est inductible par l'oleate de methyle. La production a ete augmentee d'un facteur 20 en optimisant les conditions de culture. Botrytis cinerea a ete teste pour l'hydrolyse de corps gras en milieu organique. La lipase presente une activite importante et une selectivite tres marquee vis-a-vis des acides gras insatures