Détection et localisation de modifications post-traductionnelles ou de mutations sur des protéines par spectrométrie de masse

Detection and localization of posttranslational modifications or mutations in proteins by mass spectrometry

• Auteur / Autrice : Françoise Pratbernou
• Direction : Jean-Claude Promé
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Spectrométrie de masse
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéines -- Analyse

Spectrométrie de masse

Protéines plasmatiques

Résumé

La spectrometrie de masse fab occupe a l'heure actuelle une place importance dans l'etude des proteines; elle trouve sa pleine utilisation dans certaines analyses tres difficiles a realiser par les methodes traditionnelles comme la localisation et la determination de modifications post-traductionnelles et de mutations en pathologie humaine. Des analyses utilisant conjointement des methodes de spectrometrie de masse: fab-mapping et spectrometrie de masse en tandem et des degradations enzymatiques nous ont permis de caracteriser de nouveaux mutants de l'hemoglobine (mutant grenoble et mutant r). La strategie utilisee a ete prealablement testee sur des mutants connus. L'identification de deux residus acetyle sur des enzymes erythrocytaires mpgm et dpgm a ete realise selon des strategies voisines. Afin d'essayer de resoudre les problemes poses par la desorption de peptides en melange dans le mode d'ionisation fab, nous avons, en regard avec des donnees de la litterature, realise une serie de derivations tendant a augmenter l'hydrophobie des differents constituants et accroitre ainsi le rendement d'ionisation. Cette technique de derivation a permis la visualisation de la totalite des peptides issus de la chaine ainsi que l'identification de modifications post-traductionnelles sur le peptide c terminal de la tubuline qui n'etait pas desorbe a l'etat natif