Induction de la maturation de cellules de cancer du sein en culture (lignée MCF-7)

Effects of differentiation inducing agents on maturation of human mcf-7 breast cancer cells

• Auteur / Autrice : Nicolas Guilbaud
• Direction : Annie Valette
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacologie cellulaire
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cultures cellulaires

Cellules -- prolifération -- thèses

Différenciation cellulaire

Anticancéreux

Cancer du sein

Résumé

Les cellules de cancer du sein en culture et notamment la lignee mcf-7 sont capables sous l'effet de substances pharmacologiques d'exprimer des caracteristiques de cellules plus differenciees. Apres traitement des cellules mcf-7 par le tpa (12-o-tetradecanoylphorbol-13-acetate), le butyrate de sodium, la forskoline ou des solvants polaires nous avons degage les principales caracteristiques de ce phenomene de maturation dans des conditions de culture sans serum: 1) arret de la croissance, consequence d'un blocage dans la phase g1 du cycle cellulaire; 2) diminution de la capacite des cellules a cloner en agar; 3) acquisition d'une morphologie de cellules secretrices et induction de la secretion de lipides dans le milieu de culture; 4) augmentation de l'expression d'un antigene de differenciation (ema); 5) diminution des recepteurs des strogenes. D'autre part, l'acide retinoique est capable de ralentir la croissance des cellules mcf-7 mais ne modifie pas leur phenotype. Ce compose potentialise cependant les effets antiproliferatifs et maturateurs de la forskoline. Pour etudier la croissance des cellules mcf-7 sur un modele plus representatif de la tumeur que la culture de cellules en monocouches nous avons mis au point un protocole de culture de cellules en spheroides. Dans ce modele tridimensionnel in vitro une zone centrale de necrose apparait aux environs du 15eme jour de culture. Par des techniques d'immunocytochimie et des etudes ultrastructurales nous avons mis en evidence le caractere polarise des cellules qui composent la couche la plus externe des spheroides. Nous avons compare l'efficacite de substances pharmacologiques cytotoxiques (navelbine), cytostatiques (tamoxifene) et d'un inducteur de maturation (dimethylformamide) sur la croissance des cellules mcf-7 cultivees en monocouches et en spheroides. Nous avons ainsi demontre que le modele spheroide est adapte a l'etude du controle de la pro