Mise au point de systemes de vecteurs navettes a adn simple brin et application a l'etude de la mutagenese uv-induite dans les cellules simiennes

Use of single-standed dna from shuttle vectors for the study of uv-induced mutagenesis in monkey cells

• Auteur / Autrice : Catherine Madzak
• Direction : Daniel Blangy
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Des vecteurs navettes (bases sur sv40) pouvant etre produits sous forme d'adn simple brin dans la bacterie grace a l'origine de replication du bacteriophage f1, ont ete utilises pour l'etude de la mutagenese uv-induite dans les cellules simiennes. La frequence de mutagenese spontanee apres transfection d'adn simple brin est dix fois plus elevee qu'apres celle d'adn double brin. L'adn simple brin est plus sensible a l'inactivation par irradiation uv, et l'augmentation de mutagenese uv-induite est plus forte. Ces resultats peuvent etre attribues a l'absence d'excision-resynthese et de recombinaison post-replicative sur une matrice simple brin. Le spectre de mutagenese uv-induit obtenu apres transfection d'adn simple brin est similaire a celui observe pour un vecteur double brin, a l'exception d'une augmentation de la frequence des decalages du cadre de lecture. Une importante frequence de mutations multiples est observee apres transfection d'adn simple brin, irradie aux uv ou non. Ce phenomene, ne pouvant pas s'expliquer par le nombre de lesions uv-induites, met en evidence l'existence d'un mecanisme de replication infidele pouvant s'exercer sur une matrice simple brin (peut-etre au niveau de breches laissees en face des lesions lors de la replication) dans les cellules simiennes