Recherche Avancée

Thèse soutenue

Developpement et mise en Œuvre d'un microspectrofluorimetre. Application a l'etude de l'interaction de deux retinoides aromatiques, l'etretinate et l'acitretine, avec des fibroblastes humains cutanees en culture

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Auteur / Autrice : VERONIQUE CARILLET
Direction : Paul Vigny
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1990
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Nous decrivons la realisation et la mise en Œuvre d'un microspectrofluorimetre (msf), appareil destine a effectuer des mesures topographiques ou spectroscopiques de l'intensite d'un signal fluorescent issu d'une cellule unique vivante, ceci quantitativement et en temps reel. De plus, l'interet du msf reside dans la possibilite d'obtenir pour des sites intracellulaires des spectres d'emission de fluorescence. Nous avons illustre les performances de l'equipement en utilisant comme sondes fluorescentes deux retinoides aromatiques, l'etretinate et l'acitretine, introduites par des vecteurs lipoproteiques dans des fibroblastes humains cutanes en culture. Dans un premier temps, nous presentons les caracteristiques spectroscopiques des deux sondes. Puis, nous presentons des resultats sur l'interaction des retinoides avec les fibroblastes. Nous mesurons les taux d'incorporation des retinoides en fonction du vecteur. En particulier, nous avons cherche si le retinoide provoquait une deregulation du catabolisme intracellulaire des ldl. Dans un deuxieme temps, nous faisons la description de l'appareil et de ses performances. Dans un troisieme temps, nous presentons des resultats en msf sur la localisation des retinoides dans les fibroblastes et plus particulierement de l'etretinate dans les lysosomes, par comparaison avec la distribution d'un marqueur specifique, le lucifer yellow. Puis, nous montrons l'enregistrement de spectres de fluorescence et des mesures de blanchiment de l'etretinate et du lucifer yellow