Caracterisation des interactions de la methylase dam d'e. Coli avec ses substrats

Characterisation of the interactions of e. Coli dam methylase with its substrates

• Auteur / Autrice : AGNES BERGERAT
• Direction : WILHEIM GUSCHLBAUER
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

La methylase dam (dna-adenine-methylase) d'e. Coli reconnait les sites gatc sur l'adn et transfere un groupement methyl de la s-adenosyl-methionine sur le groupement amino des adenines de ces sites. La methylase dam localise les sequences gatc sur le genome par fixation aleatoire sur l'adn non specifique, puis diffusion jusqu'au site le plus proche. Ce mecanisme de diffusion le long de la double helice est aussi suivi par l'enzyme pour aller d'un site a l'autre. La methylase dam est donc une enzyme processive. La methylase dam presente une affinite particuliere pour chacun des brins d'un site gatc en fonction des sequences adjacentes. Elle interagit donc de facon asymetrique avec le site gatc double brin. L'ado-met joue deux roles aupres de la methylase dam. Elle a un role d'effecteur allosterique. En effet, quand l'enzyme se fixe sur un site gatc en presence d'ado-met elle subit un remaniement de conformation qui renforce son affinite pour ce site et la rend capable de catalyser la reaction de methylation. Ce rearrangement qui pourrait etre l'ajustement induit de l'enzyme autour du site gatc correspond a la formation d'un complexe ternaire actif. Elle a aussi un deuxieme role, catalytique en tant que donneur de groupements methyl. Pour remplir chacune de ces fonctions l'ado-met se fixe a l'enzyme sur deux sites distincts avec deux affinites differentes