Une nouvelle technique d'isolement de la region apicale des tissus epitheliaux : application a l'etude de la reponse antidiuretique de la vessie de grenouille

A novel technique for the isolation of the apical border of epithelial tissues : application to the study of antidiuretic response in the frog urinary bladder

• Auteur / Autrice : Jean-Marc Verbavatz
• Direction : SYLVIE BUSSON, Daniel Sandoz
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Nous avons cherche une methode permettant d'identifier des proteines mises en place par l'hormone antidiuretique (adh), dans le membrane plasmique apicale de la vessie de grenouille. Une technique de fractionnement du pole apical de l'epithelium vesical de grenouille par cryofracture dirigee, a ete mise au point. Elle permet d'isoler de grandes surfaces du feuillet exoplasmique de la membrane plasmique. Les principales proteines recoltees dans ces fractions membranaires ont ete identifiees par electrophorese sur gel de polyacrylamide. L'adaptation de grenouilles a un milieu hypertonique semble etre un moyen interessant pour isoler davantage de proteines impliquees dans la permeabilite hydrique. Des anticorps diriges contre les proteines recoltees apres stimulation hormonale ont un effet inhibiteur sur la permeabilite hydrique en presence d'un flux net important. En electrophorese bidimensionnelle, des proteines liees a l'action de l'adh ont ete identifiees. Une caracterisation complete de ces proteines pourrait permettre une meilleure comprehension du mecanisme d'action de l'adh, commun a la vessie et la peau des amphibiens, comme aux canaux collecteurs du rein des mammiferes