Etude du mouvement des vesicules du systeme endocytique dans des fibroblastes de souris, clone 1d, vivants, par recouvrement de fluorescence apres photoblanchiment

Study of the motion of endocytic vesicles into living clone 1d mouse fibroblasts by fluorescence recovery after photobleaching

• Auteur / Autrice : Bruno Pouvelle
• Direction : Philippe Wahl
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Orléans

Résumé

Nous avons developpe une methode de mesure des mouvements des vesicules endocytiques par le recouvrement de fluorescence apres photoblanchiment (frap). Notre etude a porte sur des fibroblastes de souris, clone 1d, ayant endocyte du dextrane de masse 40000 marque a la rhodamine b (rd). Nous avons trouve qu'il existe trois groupes de vesicules endocytiques, a tous les stades de l'endocytose que nous avons etudie: une classe de vesicules mobiles rapides ayant une vitesse comprise entre 7 et 11 m s##1 a 17c, une classe de vesicules mobiles lentes dont la vitesse est comprise entre 0,3 et 0,8 m s##1 a 17c et une classe de vesicules immobiles a l'echelle de temps que nous utilisons. Les vesicules immobiles sont situees en majorite dans les zones d'accumulation du rd alors que les vesicules mobiles rapides sont majoritaires dans la zone de faible concentration en rd. La vitesse lente que nous mesurons correspond assez bien aux vitesses des endosomes qui sont donnees dans la litterature. Nous attribuons le mouvement rapide a de petites vesicules de diametre inferieur a la resolution optique des microscopes. L'action d'inhibiteurs metaboliques montre que ces mouvements sont energie-dependants. Nos resultats sont en accord avec certaines observations de microscopie electronique (marsh et al. , 1986). Les petites vesicules pourraient contribuer au transfert du materiel d'un compartiment endocytique a un autre, comme palade en a emis l'hypothese (1975)