Localisation intracellulaire des premieres etapes de la o-glycosylation. Etude de la biosynthese d'une glycoproteine membranaire des leucocytes : leukosialine (cd 43)

Intracellular localization of the first steps of o-glycosylation. A study of the biosynthesis of a leukocyte membrane glycoprotein: leukosialin (cd 43)

• Auteur / Autrice : Véronique Piller
• Direction : Michel Monsigny
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Orléans

Résumé

La o-glycosylation est une modification post-traductionnelle des proteines par laquelle la n-acetylgalactosamine est transferee sur les serines et les threonines des chaines peptidiques des glycoproteines nouvellement synthetisees. Ce transfert est generalement suivi par l'addition sequentielle de monosaccharides dont l'assemblage constitue les o-glycannes. Cependant, la localisation intra-cellulaire des diverses etapes de la o-glycosylation est encore mal definie. Nous avons isole, a partir de graines de salvia sclarea, une lectine qui s'est revelee etroitement specifique de la premiere etape de la o-glycosylation. Cette lectine a ete ensuite utilisee en combinaison avec d'autres lectines, des anticorps specifiques et aussi des methodes d'analyse structurale pour etudier la biosynthese d'une glycoproteine membranaire leucocytaire tres richement o-glycosylee: la leukosialine ou cd 43. Dans les cellules t-lymphoblastiques humaines jurkat, ou nous avons vu que la o-glycosylation est bloquee apres la premiere etape a cause d'un deficit en beta 1,3 galactosyltransferase, nous avons pu montrer que l'initiation de la o-glycosylation de la leukosialine n'intervient pas dans le reticulum endoplasmique, mais apres que les molecules nouvellement synthetisees aient atteint le cis golgi. Cette initiation est d'autre part terminee avant que les proteines arrivent dans le golgi median. Dans les cellules erythroleucemiques humaines k 562, nous avons constate que l'initiation se fait egalement dans le cis golgi et que l'elongation (addition de galactose et d'acide n-acetylneuraminique) peut etre decelee aussi dans le cis golgi. Dans les lymphocytes t humains, l'analyse structurale des o-glycannes de la leukosialine a revele un changement au cours du processus d'activation (tetrasaccharides pour les cellules quiescentes, hexasaccharides pour les cellules activees). Ce changement correspond a la regulation differe