Clonage et séquençage de trois gènes de la famille des inhibiteurs de protéases à sérine : leur régulation par l'hormone de croissance et les médiateurs de l'inflammation

Molecular cloning of three genes encoding rat serine protease inhibitors : their regulation by growth hormone, and inflammatory factors

• Auteur / Autrice : Gilles Pagès
• Direction : Gérard Ailhaud
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie moléculaire et cellulaire
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Nice

Mots clés

Mots clés contrôlés

Transcription génétique

Inflammation

Hormones

Inhibiteurs des sérine-protéases

Gènes

Foie

Résumé

Les séquences d'ADN complémentaires de trois inhibiteurs de protéases à sérine hépatiques de rat, SPI-1, SPI-2 et SPI-3 possèdent, à l'exception du site anti-protéase, une homologie de 70 à 90%. Ces ADN complémentaires codent pour des polypeptides d'environ 45000 daltons. Les protéines SPI-1 et SPI-2 sont fortement régulées par l'hormone de croissance, les glucocorticoïdes potentialisant son action. La production de SPI-3 augmente considérablement au cours de l'inflammation. Les trois gènes correspondant sont organisés en 5 exons et 4 introns. L’analyse des régions 5 montre : 1) une très forte homologie dans la zone proximale du site d'initiation de la transcription couvrant environ 350 nucléotides ; 2) la conservation de l'homologie entre SPI-1 et SPI-2 et une totale divergence avec SPI-3 en amont de ce point. De plus, la région proximale du promoteur SPI-3 possède une insertion de 42 paires de bases contenant un palindrome très similaire à la séquence de reconnaissance du facteur transcriptionnel NFKB. La transfection de plasmides portant des délétions variables de l'extrémité 5 du gène SPI-1 a montré que le fragment d'ADN contenant les 172 nucléotides proches du site d'initiation de la transcription suffisait pour induire une activité maximale du promoteur. Des expériences de transcription en systèmes cellulaire et acellulaire ainsi que des expériences d'empreinte à la DNASE n'ont pas permis d'identifier une région spécifiquement impliquée dans l'action de l'hormone de croissance, dans une zone du promoteur couvrant 850 nucléotides