Contribution à l'étude des sites actifs des ribosomes de mammifères : rôle et localisation des phosphoprotéines acides de la sous-unité 60S des ribosomes de foie de rat

Contribution to the study of the active sites of mammalian ribosomes: topography and role of the acidic ribosomal phosphoproteins of the rat liver 60s ribosomal subunit

• Auteur / Autrice : Jean-Pierre Lavergne
• Direction : Jean-Paul Reboud
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Biochimie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Jury : Président / Présidente : Jean-Paul Reboud

Mots clés

Mots clés contrôlés

Guanine-nucléotides

Phosphorylation

GTPases

Phosphoprotéines

Chromosomes -- Cartes

Ribosomes

Résumé

Les sous-unites ribosomiques 60s de foie de rat ont ete reconstituees partiellement a partir des ''cores'' c#d#m#m#a inactifs obtenus apres action de l'acide 2-3 dimethylmaleique (dmma) et du surnageant correspondant (sndmma) contenant specifiquement les phosphoproteines po p1 p2 + (l10a, l12, l22 et l24). P1 p2 sont presentes dans ce surnageant sous forme d'un complexe renfermant deux copies de p1 et de p2. Les sous-unites reconstituees ont des proprietes physico-chimiques (, s#2#0#0, ) et catalytiques (attachement enzymatique de phe arnt, synthese de poly(phe), activite gtpase et attachement de gdp dependants de ef-2) voisines de celles des sous-unites 60s initiales. L'addition de p1 p2 seules aux ''cores'' c#d#m#m#a restaure aussi bien que le sn#d#m#m#a l'activite gtpase dependante de ef-2, liee aux seules sous-unites 60s, et a un effet stabilisateur sur la conformation de celles-ci. De plus l10a et/ou l12 sont necessaires a l'interaction des sous-unites 60s avec les 40s et/ou les aminoacyl-arnt. Lors de la reaction gtpase dependante de ef-2, p1 fixe specifiquement le gdp. La possibilite que les phosphoproteines (p0 p1 p2) jouent un role dans la dissociation du complexe ef-2-gdp et le recyclage du facteur est discutee. La majorite de p0 p1 p2 est phosphorylee dans les ribosomes natifs. L'addition de p1 p2 dephosphorylees a des ''cores'' c#d#m#m#a aboutit a la formation de particules inactives. L'existence d'une quatrieme proteine (p2) de meme masse moleculaire que p2 est mise en evidence. ''in vitro'' p1 p2 et p2 sont monophosphorylees par la caseine kinase ii sur le meme residu ser, vraisemblablement situe vers l'extremite c-terminale commune aux trois proteines. Les proteines p1 p2 sont aussi presentes dans le cytoplasme et phosphorylables par la meme kinase