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Thèse soutenue

Contribution à l'étude de la transition protéine intermédiaire--protamine au cours de la spermiogenèse de la seiche, Sepia officinalis

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Auteur / Autrice : Marie-Christine Chartier-Harlin
Direction : Pierre Sautière
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biochimie
Date : Soutenance en 1990
Etablissement(s) : Lille 1

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Protamines
Mollusques marins
Reproduction (biologie)
Seiches
Spermatogenèse

Résumé

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Chez la seiche Sepia Officinalis, la spermiogénèse est caractérisée par une double transition protéique nucléaire: histones-protéine intermédiaire (t)-protamine (sp). Les structures primaires des protéines t et sp suggèrent l'existence d'une filiation entre ces 2 protéines. Il peut s'agir soit d'un phénomène de protéolyse, soit d'un mécanisme de régulation au niveau génique. 1. La structure primaire de la protéine t a été établie. Elle comprend 2 variants majeurs t1 et t2 de 78 et 77 résidus. Leur séquence est asymetrique, tous les résidus d'arginine étant accumulés dans les 2/3 c-terminaux. Cette région basique des protéines t1 et t2 présente une identité structurale complète avec la séquence des protamines sp1 et sp2. Le site éventuel de coupure serait situé au niveau d'un coude béta comme chez les précurseurs d'hormone. 2. L'enrichissement des arnm codant pour la protéine t s'accompagne de ceux codant pour une protéine de migration électrophorétique semblable à la protamine sp. Nous avons fabriqué avec ces arnm enrichis 2 banques d'adnc, l'une en plasmice puc13 et l'autre en phages lambda gt10. Nous avons obtenu, par la méthode d'hybridation adnc/arnm, puis traduction des arnm, une sonde valable dans la banque plasmidique. Cette sonde (p48) nous a permis de sélectionner un grand nombre de clones positifs dans la banque de phages lambda gt10. Le clone 5/20 a été séquencé: il comprend la partie codant de la protéine t2 (résidus 17-77) et la région 3 non codante. Grâce à ces travaux, l'étude des mécanismes de régulation des gènes codant pour les protéines spécifiques de la spermiogénèse de la seiche va pouvoir se développer