Etude de la sécrétion et développement de nouvelles conditions de culture pour la production des enzymes ligninolytiques par le basidiomycète Phanerochaete chrysosporium INA-12

Study of secretion and development of suitable growth conditions for ligninolytic enzymes production by the basidiomycete Phanerochaete chrysosporium INA-12

• Auteur / Autrice : Cécile Capdevila
• Direction : Jean-Pierre Belaich
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et microbiologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences (1969-2011)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Réticulum endoplasmique

Mitochondries végétales

Peroxydase

Lignine

Résumé

Phanerochaete chrysosporium, basidiomycete de la pourriture blanche du bois, secrete plusieurs enzymes ligninolytiques. Les faibles quantites de lignine et manganese peroxydases actuellement produites et l'inhibition partielle de l'excretion de ces enzymes par l'agitation limitent leur utilisation pour des procedes de delignification ou de depollution. Nos objectifs ont donc ete de definir de nouvelles conditions de culture permettant une synthese plus importante de la lignine peroxydase par p. Chrysosporium ina-12. Le changement de temperature 37#o/30#oc, realise apres 2 jours d'incubation, entraine une augmentation du reticulum endoplasmique du champignon et de la production d'enzyme. La synthese de lignine peroxydase est augmentee par l'addition d'une source phospholipidique pauvre en phosphatidylcholine et enrichie en phosphatidylinositol ou par la presence d'inositol. Grace a des marqueurs enzymatiques cellulaires, nous avons montre que le metabolisme energetique (mitochondries et enzyme de la glycolyse) du champignon est augmente par la fraction acide gras (acide linoleique) de la source phospholipidique, alors que la voie de secretion (reticulum endoplasmique) est principalement stimulee par le substituant (inositol). Un modele thermodynamique de prediction de l'adhesion nous a permis de selectionner le polyurethane comme support adapte a la croissance et a la production de lignine peroxydase par p. Chrysosporium ina-12. Nous avons mis au point un procede de production de la lignine peroxydase par le champignon immobilise sur des mousses de polyurethane (systeme de recolte-recharge du milieu de culture). Cette technique a ensuite ete transposee en bioreacteur de 2 litres