Thèse soutenue

La micronucléation induite : définition d'un modèle cellulaire micronuclée pour l'étude du génome interphasique
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Auteur / Autrice : Sylvie Frackowiak
Direction : Roland Rosset
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie cellulaire
Date : Soutenance en 1990
Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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Dans les cellules ptkl de rat kangourou, un traitement prolonge a la colchicine induit la formation de sous-unites genomiques, les micronoyaux contenant de l'adn interphasique. Dans ce travail, nous nous proposons 1) de verifier l'integrite des chromosomes apres micronucleation; 2) d'identifier le contenu chromosomique des micronoyaux; et 3) de verifier l'activite de l'adn dans les micronoyaux isoles. Ainsi, grace a la cytometrie en flux, l'etude des caryotypes et un marquage immunocytochimique (auto-anticorps anti-kinetochores), nous montrons que dans nos conditions experimentales, la micronucleation n'affecte pas l'integrite des chromosomes quant a leur morphologie et leur nombre. Par ailleurs, apres isolement des micronoyaux dans des conditions vitales, nous avons compare les histogrammes en flux de micronoyaux fluorescents isoles et de chromosomes metaphasiques; l'etroite correlation dans le nombre et la distribution des pics montre qu'il est possible d'identifier le contenu en adn des micronoyaux, particulierement ceux renfermant la paire chromosomique portant un marqueur, le chromocentre. Enfin, l'etude des syntheses d'arn dans les micronoyaux revele une activite transcriptionnelle in situ et apres isolement. En conclusion, les micronoyaux s'averent d'excellents outils pour l'etude du role de chacun des chromosomes consideres individuellement, dans l'organisation et la physiologie des noyaux interphasiques