Recherche Avancée

Thèse soutenue

Etudes biophysiques sur la croissance, l'agregation et les signaux intercellulaires chez dictyostelium discoideum

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Auteur / Autrice : RICHARD THIERY
Direction : CLAUDE GARY-BOBO
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1989
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Differents aspects de la biologie de dictyostelium discoideum sont abordes a l'aide d'une approche biophysique faisant essentiellement appel a deux techniques experimentales: la fluorescence et la difussion de la lumiere. En utilisant la technique de polarisation de fluorescence de sondes membranaires lipophiles: le diphenylhexatriene (neutre) et le trimethylammonium-diphenylhexatriene (charge positivement), nous avons observe, uniquement avec la forme neutre, une diminution de fluidite membranaire au cours du developpement. D'autre part, des tentatives de mesure du calcium intracellulaire ont confirme l'impossibilite d'utiliser chez d. Discoideum les sondes fluorescentes specifiques du calcium disponibles actuellement. Par ailleurs, une technique d'analyse des signaux observes en lumiere diffusee par une suspension de cellules en reponse a un pulse d'amp cyclique a ete mise au point. Nous avons ainsi observe que l'ammoniac, catabolite naturel de ces cellules, module la mise en place progressive du systeme du reponse a l'agent chimiotactique de l'agregation cellulaire, l'amp cyclique. Ceci a ete corele avec un effet de cette molecule sur le timing de l'agregation cellulaire. Enfin, a l'aide de cet outil et d'un agent activateur de la proteine kinase c: le phorbol 12-myristate 13-acetate, nous avons egalement observe une inhibition de la phase rapide de la reponse, lorsque les cellules sont pre-incubees avec l'ester de phorbol, ce qui suggere un role regulateur de cette proteine dans les evenements intervenant apres la fixation de l'amp cyclique sur son recepteur membranaire