Recepteurs de la lh dans le testicule de porcelet : purification, caracterisation et obtention d'anticorps monoclonaux

Lh receptor in piglet testis: purification, characterization and production of monoclonal antibodies

• Auteur / Autrice : Bahija Jallal
• Direction : JEAN GARNIER
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1989
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Le recepteur de lh/hcg a ete purifie a partir de testicules de porcelets ages de 10 a 20 jours. Les conditions de stabilite et de stockage du recepteur a differents stades de la preparation ont ete etablies, ainsi que les conditions de solubilisation par les detergents. Deux methodes de purification ont ete employees: dans la premiere, le recepteur a ete solubilise par le triton x-100 a 0,5% et retenu sur un gel d'affinite d'hcg. Dans la seconde, c'est le complexe hcg-recepteur qui a ete solubilise: cette fois, le ligand d'affinite etait constitue par un anticorps monoclonal anti-hcg. Deux series d'anticorps monoclonaux anti-recepteur ont ete obtenues. Les premiers ont permis des etudes comparatives des recepteurs de lh et de tsh. Les seconds ont permis l'etude immunostructurale du recepteur de lh. Des experiences d'immunoempreinte, de ligand-blotting et de pontage covalent ont montre que le recepteur de lh etait constitue d'une seule chaine polypeptidique de 80 kda. Un des anticorps obtenus a conduit au clonage du dnac du recepteur de lh dans le laboratoire du pr. Milgron, a kremlin-bicetre