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Thèse soutenue

Sénescence et protéolyse chez les nodosités de Phaseolus Vulgaris L. : relations avec la fixation d'azote

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Auteur / Autrice : Dominique Pladys
Direction : Jean Rigaud
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences naturelles
Date : Soutenance en 1989
Etablissement(s) : Nice

Résumé

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D'importantes activités protéolytiques ont été décelées dans le cytosol des nodosités fonctionnelles et sénescentes de Phaseolus Vulgaris L. Chez les jeunes nodosités, une protéase à sérine, très active à pH acide et ayant une grande affinité pour la léghémoglobine a ainsi été identifiée. Lors du vieillissement des nodosités, l'activité protéolystique mesurée à pH acide augmente tandis qu'une intense protéolyse apparait à pH alcalin. Deux protéases à cystéine, spécifiques de cette phase de sénescence, ont été partiellement purifiées ; elles présentent elles aussi une grande affinité pour la léghémoglobine ce qui nous a conduit à recommander l'utilisation de cette hémoprotéine, comme substrat spécifique, pour la détermination de la protéolyse nodulaire. Une première manifestation de la sénescence serait une forte diminution de la concentration en protéine soluble des nodosités, et plus particulièrement de la léghémoglobine, qui est associée à une perte importante de la capacité de réduction de C2H2. Une étude cytologique de nodosités de Phaseolus de différents âges, réalisée en microscopie électronique, a permis de suivre l'évolution de l'ultrastructure du tissu fixateur : les jeunes nodosités ne présentent qu'un à deux bactéroïdes par vésicule mais la fusion des membranes péribactéroïdiennes entraîne rapidement un accroissement de leur nombre chez les nodosités plus âgées. Ce vieillissement s'accompagne d'une densité plus faible du cytosol des cellules hôtes, traduisant l'existence de phénomènes lytiques qui seront responsables, dans un stade ultime, de la rupture de la membrane péribactéroïdienne, libérant ainsi le partenaire symbiotique dans le cytosol. Cette décompartimentation va faciliter la lyse du bactéroïde dans les cellules infectées des nodosités les plus âgées. Des incubations de bactéroïdes isolés de nodosités fonctionnelles en présence d'enzymes prote