Modifications chimiques de coenzymes à adénosine et applications

Chemical modifications of adenosine coenzymes and applications

• Auteur / Autrice : Manuelle Maurice
• Direction : Armand Lattes
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Production et traitement des matières premières végétales
• Date : Soutenance en 1989
• Etablissement(s) : Toulouse, INPT

Mots clés

Mots clés contrôlés

Oxydoréductases

Adénosylméthionine

Oxyde d'éthylène

NAD (coenzyme)

Coenzymes

Résumé

La possibilite d'utiliser les deshydrogenases pour la synthese de produits a haute valeur ajoutee presente un interet particulier a cause de la grande stereo- et regio specificite de ces enzymes. Une production a l'echelle industrielle dans un reacteur a flux continu pose le probleme de la regeneration et de la retention du coenzyme. Nous nous sommes interesses a la synthese de l-carnitine par reduction stereospecifique, de la deshydro-3 carnitine par la carnitine deshydrogenase de pseudomonas putida. Six derives du nad#+ ont ete prepares par substitution nucleophile sur l'adenine (n#6 ou c-8), deux d'entre eux ont ete greffes sur polyethyleneglycol (masse molaire 20000). Les constantes cinetiques de la carnitine deshydrogenase, de la formiate deshydrogenase, de l'alcool deshydrogenase et de la diaphorase pour les six derives ont ete determinees. Leur reduction sur electrode de mercure et de platine a ete etudiee. Le peg-n#6-(amino-6 hexyl) carbamoylmethyl nad#+ a ete utilise pour produire la l-carnitine dans un reacteur discontinu contenant la carnitine deshydrogenase et laformiate deshydrogenase brutes. Le peg-n#6-nad#+ a ete aussi utilise dans une electrode enzymatique contenant la carnitine deshydrogenase et la diaphorase pour le dosage de la l-carnitine. Le capteur a flux continu mis au point est utilisable pendant 93 heures et permet de doser des concentrations en l-carnitine comprises entre 0,2 m et 1 m. La synthese d'analogues de la s-adenosylhomocysteine et de la s-adenosylmethionine a ete entreprise afin d'inhiber l'activite de la phenylethanolamine-n-methyltransferase. Trois derives de l'adenosine ont ete obtenus par modification chimique de la partie homocysteine de la s-adenosylhomocysteine et leurs proprietes inhibitrices ont ete testees vis-a-vis de la pnmt