Etude générale d'une cholestérol oxydase et de son immobilisation sur membrane de nylon : applications électro-enzymatiques

par Franck Cheillan

Thèse de doctorat en Chimie analytique

Sous la direction de Guy Lesgards.

Soutenue en 1989

à Aix-Marseille 3 , en partenariat avec Université Paul Cézanne. Faculté des sciences et techniques de Saint-Jérôme (Aix-Marseille) (autre partenaire) .

mots clés

• Cholestérol
• Enzymes immobilisées

Résumé

L'oxydation specifique du cholesterol par une cholesterol oxydase (cod) est la reaction de base des techniques enzymatiques de dosage de ce substrat. La detection amperometrique de l'oxygene consomme au cours de la reaction est une methode de choix parmi les techniques electrochimiques. L'immobilisation de la cholesterol oxydase sur support solide permet de reutiliser la meme quantite d'enzyme pour un grand nombre d'essais. Dans le cadre de cette etude nous avons recherche les conditions favorisant a la fois la reponse electrochimique ainsi qu'une expression optimale de l'activite catalytique. Une bonne immobilisation necessite une connaissance approfondie de l'enzyme: les caracteristiques physicochimiques de la cholesterol oxydase de pseudomonas ont ete determinees. L'enzyme a ete immobilisee sur membrane de nylon selon une technique precedemment decrite. Afin d'ameliorer la reproductibilite de l'immobilisation et la conservation de l'activite residuelle, chaque etape a ete systematiquement etudiee tant sur le plan de la reactivite que sur un plan morphologique. Enfin nous avons recherche les caracteristiques de la cholesterol oxydase immobilisee sur nylon, montrant ainsi l'interet de l'utilisation de l'enzyme immobilisee dans la perspective de la realisation d'un dosage automatique du cholesterol

Titre traduit

General study of cholesteroloxidase and its immobilization on nylon membrane. Electro-enzymatic applications

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