Contribution à l'étude de la nitrate réductase de tabac : aspect moléculaire

Contribution to the study of the tobacco nitrate reductase : molecular aspect

• Auteur / Autrice : Fabienne Galangau-Querat
• Direction : Michel Caboche
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques
• Date : Soutenance en 1988
• Etablissement(s) : Paris 11
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Lumière

Nitrates

Nicotiana tabaccum

ARN messagers

Tabac

Mots clés libres

Nitrate réductase

Résumé

Parmi les réactions impliquées dans l'assimilation du nitrate, la première étape (réduction du nitrate en nitrite) occupe une place prépondérante. Cette réaction est catalysée par le nitrate réductase dont l'expression du gène et l'activité sont régulés par de nombreux facteurs. Nous avons choisi d'étudier plus particulièrement l'influence de certains de ces facteurs la lumière et le nitrate. Nous avons tout d'abord caractérisé par traduction ''in vitro'' d'ARNm puis immunosélection des produits de traductions, la nitrate réductase da maïs et de tabac. Puis disposant de l'ADNc de I'ARNm de la nitrate réductase de tabac, nous avons suivi l'évolution de la quantité de I'ARNm de la nitrate réductase et parallèlement celles de la protéine et de son activité. Ainsi, au cours du nycthémère, nous avons montré que la quantité d'ARNm du nitrate réductase atteignait un maximum au lever du jour et coïncidait avec un maximum de l'activité enzymatique correspondante, la quantité de protéine atteignant un maximum 5 heures après. A la fin du jour, la quantité d'ARNm diminue pour devenir indétectable. Ces résultats tendent à confirmer le rôle, probablement indirect, de la lumière sur la régulation de la transcription du gène de la nitrate réductase. Les études menées sur l'influence d'une carence en nitrate ont montré qu'en l'absence d'activité enzymatique, la proportion de I'ARNm de la nitrate réductase n'est pas spfécifiquement modifiée. Par contre l'addition de nitrate provoque spécifiquement son augmentation suivie, en quelques heures, de celles de la protéine et de son activité. Enfin, nous avons mis en évidence une répression métabolique, par les produits de la chaîne d'assimilation du nitrate, sr la quantité d'ARNm de la nitrate réductase.