Recherche Avancée

Thèse soutenue

Contribution à l'analyse du métabolisme phospholipidique et de la génération des métabolites de la voie phospholipase A₂ et-ou C : étude dans deux modèles cellulaires : le muscle utérin et les polymorphonucléaires

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Auteur / Autrice : Sylvain Bourgoin
Direction : Simone Harbon
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biochimie
Date : Soutenance en 1987
Etablissement(s) : Paris 11
Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne)

Résumé

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I- La première partie du travail consiste à analyser le métabolisme phospholipidique du muscle utérin et à préciser le rôle potentiel de la lipoxygénase dans les accumulations de GMPc au cours des stimulations muscariniques. 1) L’acide arachidonique (AA) peut être métabolisé non seulement par la voie de la cyclo-oxygénase (CO) avec synthèse de PGI₂, mais également par la voie de la lipoxygénase (LO) que nous avons pu mettre en évidence et caractériser dans ce tissu : démonstration d’une spécificité type 12 grâce à l’utilisation d’inhibiteurs spécifiques et à la technique de séparation fine par HPLC. Cette étude a permis : a) de mettre en évidence une régulation physiologique au cours de la gestation au niveau de l’expression des activités CO et LO, b) de confirmer le rôle de cette 12-LO dans les stimulations GMPc, et c) de réaliser une étude comparative de la 12-LO et de la guanylate cyclase soluble. Un rôle inhibiteur du GMPc au niveau de certaines activités Ca2+ dépendantes a été entrevu. 2) Le carbachol mais également l’oxytocine décrits pour augmenter l’accumulation d’IP₃ modulent d’une manière spécifique le métabolisme des phosphoinositides du muscle utérin : l’étude de la répartition de la radioactivité incorporée à partir du [3H]-AA dans les différents lipides associée à des dosages quantitatifs ont permis de démontrer que ces deux effecteurs stimulent d’une part la libération d’AA et d’autre part conduisant à une synthèse accrue de DAG et de PA, ceci étant associé à un métabolisme accru du ([3H]-AA)PI. Le PI serait la cible d’une phospholipase C et A₂ dont les activités se trouveraient modulées par le carbachol et l’oxytocine. Toutefois, la méthodologie ne s’est pas révélée satisfaisante pour mettre en évidence une génération de 12-HETE au cours de la stimulation muscarinique du tissu. II- Dans une deuxième partie, une approche pharmacologique de l’effet d’agents antirhumatismaux à action lente sur la génération de leucotriènes (métabolites de la 5-LO) induites par les stimuli inflammatoires (f-MLP, Paf-acether, zymozan) dans les polymorphonucléaires a permis de montrer d’une part une augmentation de synthèse des leucotriènes apparemment liée à une libération d’AA, d’autre part un effet inhibiteur spécifique aux interactions dues au f-MLP. Le problème du rôle des leucotriènes dans les processus inflammatoires se trouve ainsi posé.