Étude immunoenzymatique de phosphatases acides de champignons ectomycorhiziens
Auteur / Autrice : | Nadine Bousquet |
Direction : | Louis Salsac |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Biologie et physiologie végétale |
Date : | Soutenance en 1987 |
Etablissement(s) : | Montpellier 2 |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Résumé
Le criblage d'une dizaine d'isolats fongiques, base sur le dosage des activites phosphatases a permis de selectionner deux isolats particulierement interessants (suillus granulatus j7/5 et pisolithus tinctorius f9. Les activites mesurees a l'aide d'un substrat naturellement present dans le sol (phytate) different de celles obtenues a l'aide d'un substrat absent des milieux biologiques ( p-nitrophenyl phosphate ou pnpp). Cependant, l'influence de la concentration en phosphate inorganique (pi) du milieu de culture sur les activites phytases et tripolyphosphatases de s. Granulatus est similaire a celle classiquement obtenue sur des activites hydrolysant le pnpp: les activites phosphatases sont stimulees chez les thalles eleves sur des milieux carences en pi. Cette augmentation d'activite peut avoir deux origines: synthese de novo de proteines ou activation enzymatique. L'utilisation d'un serum polyclonal dirige contre une phosphatase acide soluble de p. Tinctorius a permis de demontrer que le pi agit au niveau de l'activite enzymatique et non au niveau de la quantite de phosphatase excretees pour des concentrations en pi comprises entre 5 et 250 micromolaires. Le serum prepare contre une phosphatase soluble, reagit avec la phosphatase secretee dans le milieu de culture du champignon: ce resultat confirme ceux precedemment obtenus a l'aide de techniques biochimiques au sujet de l'analogie entre les deux formes (soluble et excretee). Les methodes immunoenzymatiques ont, par ailleurs, ete appliquees a la caracterisation et a l'identification de champignons, seuls ou en association mycorhizienne. Ainsi, les reponses obtenues avec p. Tinctorius permettent de le differencier d'autres especes fongiques et d'evaluer le degres de mycorhization des racines par ce champignon