Contribution à la mise au point des cultures industrielles de leptospires sur milieu synthétique en vue de la préparation de principes actifs : étude adaptée à Leptospira interrogans sérogroupe ictérohaemorrhagiae

Elaboration of a protein-free medium for the industrial culture of leptospira. Assay and tests of this medium in industrial fermentors

• Auteur / Autrice : Véronique Martin
• Direction : G. Chappuis
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Microbiologie
• Date : Soutenance en 1987
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : École nationale vétérinaire (Lyon ; 1761-2010)
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : G. Chappuis

Mots clés

Mots clés contrôlés

Vaccins vétérinaires

Virus -- Inactivation

Cultures cellulaires

Leptospires

Résumé

La selection d'un milieu de culture synthetique permettant la croissance des leptospires a ete effectuee a partir de 4 nouveaux milieux. Le milieu de bey et johnson est retenu pour la suite des travaux. L'adaptation de ce milieu a des cultures en biofermenteurs de 20 litres, nous conduit a proposer l'adjonction progressive de la source de carbone en cours de culture. Le tween qui represente la source de carbone et d'energie se revele etre toxique a des concentrations peu elevees (inferieures a 300 mg/l) dans les milieux synthetiques. Il devient alors imperatif de mettre au point la detoxification de celui-ci et d'envisager son addition en cours de culture. Le protocole d'adjonction etabli, le passage au stade industriel a ete realise assez facilement. Le rendement final obtenu est proche de 10#9 leptospires par millilitre. Les principes actifs prepares sur milieu de bey-johnson inactives chimiquement ou par la chaleur et controles en vaccination epreuve se revelent satisfaisants. Quelque soit la densite finale de la culture (superieure a 10#8), les principes actifs bruts protegent a 100% les animaux vaccines. Les cultures industrielles de leptospira icterohaemorrhagiae mises au point, nous avons pu alors envisager une approche de l'etude de la souche: etude serologique, antigenique, biochimique et recherche de proprietes particulieres: virulence, hemolyse