Synthèse peptidique par catalyse enzymatique : application nouvelle à la radiosynthèse totale d'une hormone, la leucine-enképhaline tritiée, à l'aide de la carboxypeptidase Y

Use of proteolytic enzymes in peptide synthesis : new application to stepwise radiosynthesis of tritiated Leucine-enkephalin in presence of carboxypeptidase Y

• Auteur / Autrice : Florence Hellio
• Direction : Pierre Fromageot
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Génie enzymatique, bioconversion et microbiologie
• Date : Soutenance en 1986
• Etablissement(s) : Compiègne
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences pour l'ingénieur (Compiègne)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Leucine-enképhaline

Carboxypeptidases

Hormones peptidiques

Peptidases

Peptides

Tritium

Enzymes

Catalyse

Résumé

Dans ce mémoire nous présentons une nouvelle méthode de marquage au tritium d'hormones peptidiques. Cette méthode fait appel à une protéase, la carboxypeptidase Y qui catalyse la formation de liaisons peptidiques, pourvu que les conditions thermodynamiques soient favorables. L'action réversible de la CPD-Y a été appliquée à la synthèse totale d'un pentapeptide, la Leucine-enképhaline, tritié sur chaque acide aminé, et dont la radioactivité spécifique est de 139 Ci/mmole. Le peptide obtenu présente, en outre, des propriétés biologiques (liaison aux récepteurs et immunoréactivité) identiques à celles de Leucine-enképhaline native.

In this thesis we present a new tritium-labelling method of peptidic hormones. This method uses a proteolytic enzyme, carboxypeptidase Y, to catalyse peptide bonds. It has been applicated to stepwise synthesis of tritiated Leucine-enkephalin. The pentapeptide, labelled on each amino acid, has a specific radioactivity of 139 Ci/mmole. Moreover its biological properties (immunoreactivity and binding to specific receptors) are identical to native Leucine-enkephalin.