Etude du rôle de l'IL-33 sur les acteurs cellulaires des nécrolyses épidermiques

Role of IL-33 on innate and adaptative immune cells in epidermal necrolysis

• Auteur / Autrice : Sophie Lalevee
• Direction : Sophie Hue
• Type : Projet de thèse
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et moléculaire
• Etablissement(s) : Paris Est en cotutelle avec Université de Zurich
• Ecole(s) doctorale(s) : Ecole doctorale Sciences de la Vie et de la Santé
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : IMRB - Institut Mondor de Recherche Biomédicale
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Eq 16 - Physiopathologie et immunothérapies dans l’infection VIH
• Jury : Président / Présidente : Pierre Wolkenstein
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Sophie Hue, Meri Tulic, Lars French, Emmanuel Contassot, Marie-Charlotte Bruggen, Axel Villani
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Meri Tulic, Axel Villani

Mots clés

Mots clés libres

Nécrolyses épidermiques

Immunité innée

Allergies médicamenteuses

Epidermal necrolysis

Innate immunity

Drug reactions

Résumé

INTRODUCTION : La nécrolyse épidermique (NE), qui comprend le syndrome de Stevens-Johnson et la nécrolyse épidermique toxique, est la forme la plus grave de toxidermie. Elle se caractérise par un décollement cutané dû à une mort massive des kératinocytes induite par des lymphocytes T CD8+ spécifiques du médicament, à travers l'action cytolytique de diverses molécules (par exemple, perforine, granzyme B, ligand de Fas, granulysine). Un traitement spécifique hautement efficace à associer aux soins de support est nécessaire car la mortalité et la morbidité des NE restent élevées et l'efficacité des thérapies adjuvantes actuelles est encore discutée. L'interleukine (IL)-33, une cytokine de la famille de l’IL-1, a été trouvée à des niveaux élevés dans le sang périphérique des patients atteints de NE. Cependant, les effets de l'IL-33 sur la réponse immunitaire endommageant l'épiderme dans la nécrolyse épidermique n'ont pas été étudiés. METHODES : Nous avons mesuré les taux d'IL-33 dans le sang et les liquides de bulles des patients atteints de NE. Ensuite, nous avons évalué en cytométrie en flux l'expression de ST2L, le récepteur membranaire de l'IL-33, dans les cellules CD8+ T provenant du sang et des bulles des patients atteints de NE. Nous avons également évalué l'impact de l'IL-33 sur l'expression de molécules cytolytiques dans les cellules CD8+ T exprimant ST2L. RESULTATS : Nous montrons que certains CD8+ T isolés du sang et des lésions cutanées de patients atteints de NE expriment ST2L et que les cellules CD8+ST2L+ présentent un phénotype cytotoxique plus fort que les cellules CD8+ST2L- des bulles, comme en témoigne une expression élevée de granzyme B (GrzB) et de perforine (PFN). In vitro, l'IL-33, associée à l'interféron-γ - une cytokine trouvée à des niveaux élevés dans les lésions de SJS/TEN - augmente de manière synergique l'expression de PFN. CONCLUSION : Nos résultats suggèrent que l'IL-33, potentiellement libérée par les kératinocytes endommagés, est impliquée dans l'amplification des réponses cytotoxiques médiées par les cellules CD8+ T ciblant l'épiderme et, par conséquent, constitue une cible thérapeutique possible dans les NE.

BACKGROUND: Epidermal necrolysis, including Stevens-Johnson Syndrome (SJS) and Toxic Epidermal Necrolysis (TEN), is the most severe form of cutaneous adverse event. It is characterized by skin detachment due to massive keratinocyte death induced by drug-specific CD8+ T cells through the cytolytic action of various molecules (e.g., perforin, granzyme B, Fas-ligand, granulysin). A highly efficient specific treatment to associate to best supportive care is needed as mortality and morbidity of SJS/TEN remain high and the efficacy of current adjuvant therapies is still debated. Interleukin (IL)-33, a cytokine of the IL-1 family, has been found at high levels in the peripheral blood of SJS/TEN patients. However, the effects of IL-33 on the epidermis-damaging immune response in EN has not been investigated. METHODS: We measured the levels of IL-33 in the blood and blister fluids of EN patients. Then, using flow cytometry, we assessed the expression of ST2L, the membrane receptor of IL-33, in CD8+ T cells from blood and blisters of EN patients. We also evaluated the impact of IL-33 on the expression of cytolytic molecules in ST2L-expressing CD8+ T cells. RESULTS: We show that some CD8+ T cells isolated from SJS/TEN blood and skin lesions express ST2L, and that, CD8+ST2L+ exhibit a stronger cytotoxic phenotype than CD8+ST2L- blister cells as evidenced by a high granzyme B (GrzB) and perforin (PFN) expression. In vitro, IL-33 together with IFN – a cytokine found to be elevated in SJS/TEN lesions– synergistically increases the expression of PFN. CONCLUSION: Our results suggest that IL-33, possibly released by damaged keratinocytes, is involved in the amplification of the CD8+ T cell-mediated cytotoxic responses targeting the epidermis and, therefore, presents as a possible therapeutic target in SJS/TEN.