Les vecteurs lentiviraux comme outils pour la vaccination anti-virale

Lentiviral vectors as tools for antiviral vaccination

• Auteur / Autrice : Maria Candela Iglesias
• Direction : Frédéric Tangy
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie. Virologie
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Virus du Nil occidental

Techniques de transfert de gènes

Lentivirus

Vecteurs génétiques

Épitopes immunodominants

VIH (Virus de l'Immunodéficience Humaine)

Thérapie génique

Transfert génétique

Sida

Vaccins contre le SIDA

VIH (virus)

Résumé

Les vecteurs lentiviraux de transfert de gènes sont devenus des vecteurs prometteurs en vaccination ils transduisent efficacement des cellules dendritiques. Ici nous avons évalué leur potentiel comme outils de vaccination anti-virale. Dans le cadre d'une vaccination thérapeutique contre le SIDA, nous avons testé deux types de vecteurs lentiviraux : soit codant des polyépitopes CTL immunodominants du VIH. Restreints par HLA-A2 ou HLA. B7 : soit codant des protéines du SIV. Les vecteurs polyépitopiques. Stimulent des réponses CTL puissantes et diversifiées chez des souris transgéniques, qui sont encore détectées 1. 5 mois après injection unique. Les vecteurs codant Gag ou Nef stimulent chez la souris des réponses T puissantes. Nous avons évalué chez le macaque Timmunogénicité du vecteur Nef-SIV. L'injection de particules vecteur et l'injection de PC autologues transduites ex vivo stimulent des réponses T puissantes. La protection contre l'infection par le WNV nécessite la production d'anticorps neutralisants. La capacité des vecteurs lentiviraux à déclencher une réponse humorale protectrice n'a jamais été testée auparavant. Nous avons construit un vecteur lentiviral codant pour une version sécrétée de la protéine de l'enveloppe du WNV. Une immunisation unique avec une dose minime de ce vecteur stimule une réponse humorale protectrice de longue durée, stérilisante, dès 7 jours après vaccination, contre une épreuve virale létale. Cette étude élargie l'applicabilité des vecteurs lentiviraux pour la vaccination contre des pathogènes pour lesquels une réponse humorale est nécessaire pour obtenir une protection.

Lentiviral vectors derived from hiv-1, due to their capacity to transduce non-dividinq cells, have become precious gane transfer Systems, their ability to efficiently transduce dendritic cells (PC), bas also led to their successful use as vaccination vectors. Here we evaluate their potential as anti-viral vaccination vectors. To design a therapeutic vaccination strateqy aqainst AIDS, we constructed lentiviral vectors encoding polyepitopes of immunodominant HLA-A2 or B7 restricted hiv-peptides, or SIV gene fragments. A single injection in mice results in a strong immunogenicity. When immunizing HLA-A2 or B7 transgenic mice with the polyepitope-encoding vector particles, elispot and cytotoxicity assays showed a strong and broad primary T cell immune response still detected 1. 5 months after a single immunization. Injection of a GAG or NEF- encodinq vector in mice induced strong CTL responses. The nef encoding vector was evaluated in macaques : injection of vector particles or ex-vivo transduced PC stimulate strong and diversified CTL responses. Lentiviral vectors are also capable of stimulating specific humoral immune responses in mice. We constructed a vector coding for secreted form of the West Nile Virus (WNV) envelope protein, a virus for which the humoral immune response is the essential component of protective immunity. A single immunization with a minute dose of this vector was efficient at eliciting a long-lasting, protective and sterilizing humoral immunity, only one week after priming, in a mouse model of WNV encephalitis. This study broadens the applicability of lentiviral vectors as vaccines against pathogens for which neutralizing antibodies are required.