Résistance non enzymatique aux aminosides chez Pseudomonas aeruginosa

• Auteur / Autrice : Farid El Garch
• Direction : Patrick Plésiat
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Besançon
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Homme, environnement, santé (Besançon2000-2012)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Aminosides

Résistance aux antibiotiques

Pseudomonas aeruginosa

Transport biologique actif

Transport physiologique

Antibiotiques

Bactéries -- Métabolisme

Génétique moléculaire

Génétique

Bactéries -- Effets des médicaments

Résumé

Bactérie opportuniste bien connue, Pseudomonas aeruginosa est responsable d'infection bronchopulmonaire chronique chez les patients atteints de mucoviscidose. Afin de mieux appréhender les mécanismes mis en jeu par la bactérie pour résister aux nombreuses cures d'antibiothérapie par les aminosides (AGs), nous avons construit une banque d'insertion chez la souche sauvage de référence PAO1. Différents mécanismes de résistance ont ainsi été caractérisés, correspondant à : (I) l'augmentation de l'efflux actif des AGs; (II) la diminution de la perméabilité de la membrane externe aux AGs ; (III) la baisse du transport actif des AGs à travers la membrane cytoplasmique et (IV) l'altération de protéines ribosomales. Chacun des mécanismes identifiés confère à la bactérie une résistance de bas niveau aux AGs. Les hauts niveaux de résistance observés chez certaines souches cliniques pourraient résulter de l'addition de plusieurs mécanismes, ce qui a été démontré chez des doubles, triples et quadruples mutants construits in vitro

Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen responsible for chronic lung infection in patients with cystic fibrosis. Ln order to identify aminoglycoside resistance mechanisms, an insertional library was built in reference strain PAO 1 of P. Aeruginosa with a transposon. Screening of 12,000 clones on agar medium containing gentamicin led to the isolation of four groups of aminoglycoside resistant mutants showing either an alteration of the LPS, a defective electron transport chain, a lack in ribosomal protein L25, or overproduction of the efflux system MexXY. Each of these mechanisms promoted a 2-fold increase in the MICs of various aminoglycosides compared to PAO1. When combined, these alterations had addictive or multiplicative effects on resistance to aminoglycosides, resulting in MICs up to 16 fold higher than in PAO1 for clinical relevant drugs such as tobramycin. Altogether, these results show that high level resistance to aminoglycosides in P. Aeruginosa may result from the interplays of several low-level resistance mechanisms