Immunomodulation post allogreffe de moelle osseuse par l'approche gène suicide : analyse transcriptomique des lymphocytes T CD8+ produits ex vivo par voie rétrovirale et analyse cellulaire et moléculaire des cellules génétiquement modifiées après circulation in vivo chez des patients

par Marina Deschamps

Thèse de doctorat en Sciences de la vie et de la santé

Sous la direction de Christophe Ferrand.


  • Résumé

    Nous avons réalisé un essai clinique de phase I/II en infusant des lymphocytes T génétiquement modifiés (CGM) exprimant le gène Herpes-Simplex thymidine kinase (HS-tk) lors d'une greffe de moelle. Ex-vivo, nous avons montré que notre méthode de production de CGM (CD3 activation/NéoR sélection) induit des anomalies phénotypiques et fonctionnelles, limitées en suivant un protocole expérimental (CD3-CD28 activation / ΔNGFR-MACS sélection). Ln vivo, parmi les 12 patients inclus, 4 sont en vie plus de 9 ans post-greffe. Les CGM circulantes NéoR+ sont > aux HS-tk+, suggérant des délétions du gène HS-tk. Cette étude a pour but : 1/ d'obtenir, dans différentes conditions de cultures, la signature transcriptomique des CGM destinées aux patients ; et 2/ d'identifier et caractériser les altérations du gène HS-tk. - Nos résultats montrent que : 1/ le protocole expérimental est moins délétère et pourrait être utilisé en immunothérapie ; et 2/ la délétion du gène HS-tk a lieu ex-vivo lors de la production des CGM.

  • Titre traduit

    Immunomodulation after bone marrow allo-transplantation by suicide gene therapy : gene profiling of ex-vivo retrovirally transduced CD8+ T cells and cellular and molecular analysis of gene modified cells after in vivo circulation into the patients


  • Résumé

    We performed a phase I/II clinical trial of Herpes-Simplex thymidine kinase (HS-tk) expressing gene-modified T cell (GMTC) infusion at time of bone marrow transplantation (BMT). Ex-vivo, we have previously shown that our GMTC production method (CD3 activation / NeoR selection) entails phenotypical and functional alterations, limited by an experimental protocol process (CD3-CD28 activation / ΔNGFR-MACS selection). Ln vivo, among 12 patients included, 4 are still alive more than 9 years after BMT. Circulating GMTC-NeoR+ is > to GMTC-HS-tk+, suggesting HS-tk transgene deletions. The present study aims : 1/ at providing a picture of the gene profile signature of GMTC, which may be infused into patients, in different conditions of production ; and 2/ at identifying and characterize the HS-tk alterations. - Our results revealed that : 1/ experimental protocol is less deleterious and should be used in immunotherapy ; and 2/ the whole HS-tk deletion occurs during the ex-vivo production process.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (189 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 153-166 (298 réf.) et en fin des articles

Où se trouve cette thèse\u00a0?

  • Bibliothèque : Bibliothèque universitaire Santé (Besançon).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : WH.380.DES.2006
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 9505
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