Sérine/thréonine protéines phosphatases chez les trypanosomes : identification et rôle fonctionnel

Trypanosomes serine/threonine proteins phosphatases : identification and functionnal role

• Auteur / Autrice : Cécile Gallet
• Direction : Philippe Grellier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie moléculaire et cellulaire des protozoaires
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Paris, Muséum national d'histoire naturelle
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la nature et de l'Homme - Évolution et écologie (Paris)
• Jury : Président / Présidente : Pascale Debey
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Xavier Cayla
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Philippe Loiseau, Eric Précigout

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéasome

Trypanosoma brucei

Différenciation cellulaire

Trypanosoma cruzi

Résumé

La différenciation trypomastigote/amastigote de Trypanosoma cruzi permet de passer d'une forme allongée, flagellée incapable de se diviser (trypomastigote) à une forme ronde réplicative ayant un flagelle résiduel (amastigote). In vitro, la calyculine A (CA, inhibiteur de Ser/Thr protéines phosphatases) induit cette différenciation à pH 7,5. L'utilisation d'inhibiteurs de dégradation de protéines intracellulaires, associés à CA, ont révélé l'implication du protéasome dans ces modifications. L'effet de CA suggère que la différenciation trypo/ama implique l'inactivation de PP1 ou 2A chez T. Cruzi. Deux nouveaux gènes ont été identifiés, PP1Tc (AJ312136) et PP2ATc (AJ311369) et les protéines recombinantes correspondantes caractérisées. Une étude fonctionnelle de PP1Tb (CAA36959), homologue de PP1Tc, a été conduite chez T. Brucei par ARN interférence. Les mutants montrent un rapprochement noyau/kinétoplaste. PP1Tb semble donc impliquée dans le positionnement du noyau au sein de la cellule.

Trypomastigote/amastigote differentiation in Trypanosoma cruzi allows passage from an elongated, flagellated and non-replicative form (trypomastigote) to a round replicative, aflagellated form (amastigote). In vitro, calyculin A (CA, Ser/Thr protein phosphatases inhibitor) induces this differentiation at pH 7. 5. Firstly, use of intracellular proteins degradation systems inhibitors, in association of CA, permitted to implicate proteasome in these main morphological modifications. Secondly, CA effect suggests that T. Cruzi trypo/ama differentiation is induced by PP1 or 2A inactivation. Then, two new genes were identified PP1Tc (AJ312136) and PP2ATc (AJ311369) and corresponding recombinant proteins characterized. Finally, functional study of PP1Tb (CAA36959), PP1Tc homologous, was realised in T. Brucei by RNA interference. Mutants revealed a dramatic nucleus/kinetoplast proximity. PP1Tb seems to be implicated in nucleus positioning in the cell.