Rôle de l'exoenzyme S de Pseudomonas aeruginosa dans la virulence bactérienne : étude fonctionnelle du domaine GAP et de ses cibles sur la réponse immunitaire chez Drosophila melanogaster

Rote of the Pseudomonas aernginosa Exoenzyme S in the bacterial virulence : fimctioma.l study of the GAP domain and ofits targets in Drosophil melanogaster innate immunity

• Auteur / Autrice : Amélie Avet-Rochex
• Direction : Marie-Odile Fauvarque
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Virologie, microbiologie, immunologie
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Grenoble 1

Résumé

L'exoenzyme S, \Ille toxine de type III, de Pseudomonas aeruginosa possède W1 domaine GAP (GTPase Adivating Protein) (ExoSGAP) inhibant les Rho GTPases (Rho, Rac, Cdc42) et la phagocytose dans les cellules de Mammifères en culture. J'ai utilisé une approche de transgenèse chez Drosopbila melanogaster en utilisant un système d'expression tissu-spécifique inductible (U AS-GaJ4) afm d'exprimer ExoSGAP. Nous avons montré qu'ExoSGAP cible in vivo les Rho GTPases Rho, Rac1, Rac2 et Cdc42. ExoSGAP affecte la résistence des mouches aux infections en inhibant la phagocytose des bactéries par les plasmatocytes, des cellules de type macrophage, mais n'a pas d'effet sur les voies NF-kB. Une approche génétique a permis d'identifier de nouvelles cibles de la toxine, en recherchant des gènes dont la déréguIation modifie le phéndype d' œil ou d'aile induit par l'expression d'ExoSGAP. Nous avons identifié plusieurs gènes pouvant avoir un rôle dans les voies des JNK et NF-kB Ces résultats valident une stratégie d'étude des toxines de type III par transgenèse chez la drosophile. J'ai pa. RaIIèlement momré la spécificité de la GTPase Ra. C2 dans la résistance des mouches aux infections bactériennes. Rac2 participe notamment à la phagocytose. Les travaux du Dr. H. Tricoire ont permis d'identifier 180 gènes dont la dérégulation modifie la réponse des mouches à un stress oxydant. J'ai testé 105 de ces lignées pour leur résistance aux infections, afin d'étudier une corrélation possible entre la réponse aux stress oxydant et infectieux. Ce crible a permis de montrer l'implication d'une protéine à domaine lectine PSLR (Pseudomonas Sensitive Lectin Receptor) dans la réponse imnmnitaire de la drosophile.