Analyse de l'assemblage du complexe I mitochondrial humain

Characterization of the assembly pathway of human mitochondrial complex I

• Auteur / Autrice : Ingrid Bourges
• Direction : Jean-Paul Issartel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 2003
• Etablissement(s) : Grenoble 1

Résumé

Le complexe I de la chaîne respiratoire mitochondriale humaine est composé de 45 sous-unités dont 7 sont codées par le génome mitochondrial (les sous-unités ND). De nombreux syndromes sont associés à une carence de ce complexe. Afin d'analyser son assemblage, nous avons étudié plusieurs lignées cellulaires : les C4T (sans ND4), C9T (sans ND5), rhoʿ (sans ND), la lignée parentale (143B), et des fibroblastes normaux. Nous avons caractérisés le phénotype et le génotype de ces types cellulaires, puis la composition en sous-unités du complexe I dans les cellules entières, les mitochondries, et dans les fractions matricielles et membranaires de ces organites. L'étude des sous-complexes a aussi été réalisée par sédimentation sur gradient de sucrose, BN-PAGE, immunopurifications diverses, et par spectrométrie de masse. Ainsi les modèles cellulaires vont présenter à la fois des caractéristiques communes d'assemblage du complexe I, et des traits particuliers selon la mutation portée.