Élaboration de colloïdes fonctionnalisés par des polymères : nouveaux vecteurs potentiels d'acides nucléiques

• Auteur / Autrice : Thomas Trimaille
• Direction : Thierry Delair
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Matériaux composites et polymères
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Thierry Delair

Mots clés

Mots clés contrôlés

Acides nucléiques

Nanoparticules

Émulsions

Colloïdes

Polymères

Résumé

Deux systèmes colloi͏̈daux fonctionnels pour l'adsorption d'acides nucléiques (AN) dans une optique de vectorisation ont été élaborés, en considérant deux approches : l'une basée sur un système mou de nanoémulsions, l'autre sur des particules dures biodégradables de poly(D,L-lactide)(PLA). La première approche a consisté à déposer sur des nanoémulsions de triglycérides, pendant leur formation par déplacement de solvant, différents copolymères modifiés en vue de moduler les propriétés interfaciales du colloi͏̈de vis-à-vis de l'adsorption des AN. Les copolymères poly(anhydride maléique-alt-méthyl vinyl éther) ou poly(N-acryloylmorpholine-N-acryloxysuccinimide) ont pour cela été modifiée à l'aide de bras hydrophobes (décylamine) pour favoriser l'ancrage dans le colloi͏̈des, et de bras spermine acétylée pour la complexation avec les AN. La présence du copolymère à l'interface a été démontrée par zétamétrie. La seconde approche visait à fonctionnaliser des particules de PLA par du polyéthylèneimine (PEI), en utilisant la technique Layer-by-Layer. Après préparation des particules de PLA par émulsification-diffusion et caractérisation (taille, charge de surface et stabilité colloi͏̈dale), le PEI a été adsorbé avec succès sur les particules, à pH5,7, comme attesté par inversion du potentiel zéta, microscopie à balayage et dosage de Bradford. Enfin, l'adsorption des AN sur les deux types de colloi͏̈des a été entreprise et démontrée par inversion de la charge de surface et par gel d'agarose. Les isothermes d'adsorption ont montré, pour les émulsions, que le processus de fixation était dépendant de la nature des interfaces. Il a été montré que l'affinité pour las AN, oligonucléotide ou plasmide, dépendait d'une part du nombre de charges de surface mais aussi de leur accessibilité. L'adsorption des plasmides sur le second type de colloi͏̈de a pu être optimisée en présence de sel ou en milieu tamponné.