Caractérisation morphologique et fonctionnelle des hémocytes chez l'huître plate, Ostrea edulis

Morphological and functional characterization of the european flat oyster, Ostrea edulis, hemocytes

• Auteur / Autrice : Qinggang Xue
• Direction : Marcel Le Pennec
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Océanographie biologique
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Brest

Mots clés

Mots clés contrôlés

Physiologie

Huîtres

Résumé

Les mécanismes de défense mis en jeu par les mollusques bivalves vis à vis des agents infectieux trouvent leur importance dans les recherches fondamentales et appliquées développées pour lutter contre les maladies chez ces espèces. Bien que la sélection de populations résistantes à des infections ait été entreprise chez ces animaux, les bases des mécanismes de résistance restent encore obscures, à ce jour. Il est cependant certain que les hémocytes possèdent un rôle clé. Dans ce cadre, une caractérisation de la structure et des fonctions des hémocytes chez l'huître plate, ostrea edulis, a été effectuée à l'aide de différentes techniques au cours de ce travail. Par ailleurs, certaines analyses ont porté également sur les hémocytes d'huître creuse, crassostrea gigas, afin de disposer de points de comparaison. Les hémocytes totaux d'huître plate, ostrea edulis et d'huître creuse, crassostrea gigas, ont été séparés en trois sous-populations distinctes correspondant respectivement aux granulocytes, grands hyalinocytes et petits agranulocytes par centrifugation en gradient de densité. L'analyse en sds-page de ces trois sous-populations cellulaires ainsi que celle des hémocytes totaux ont révèle des différences. Par ailleurs, les activités enzymatiques détectées au moyen du système api montrent des différences entre l'hémolymphe totale, la fraction acellulaire de l'hémolymphe, les hémocytes totaux et les sous-populations hemocytaires séparées chez ostrea edulis et crassostrea gigas. Par ailleurs, l'infection par le parasite bonamia ostreae induit une augmentation des niveaux d'activités enzymatiques dans la fraction acellulaire. La technique de fusion lymphocytaire a été utilisée pour développer des anticorps monoclonaux spécifiques des hémocytes chez l'huître plate, ostrea edulis. Un hybridome (gp2e11) produisant un anticorps spécifique des granulocytes a été sélectionné et a permis d'étudier cette population hémocytaire. Il a été ainsi possible d'observer une large distribution des granulocytes dans les tissus conjonctifs de différents organes chez des huîtres plates adultes. Par contre, l'utilisation de cet anticorps n'a pas permis de mettre en évidence de granulocytes au stade larvaire chez cette même espèce. Cet anticorps a permis par ailleurs de définir en cytométrie de flux des pourcentages de granulocyte pour des échantillons d'hémocyte d'huître plate. Ostrea edulis et d'huître creuse. Crassostrea gigas. Des analyses réalises en cytométrie de flux sur la base de l'auto fluorescence associées a un marquage des membranes mitochondriales a permis de séparer les hémocytes en populations distinctes chez l'huître plate. Cependant, le schéma de classification défini ne correspond pas à celui basé sur des caractères morphologiques. La caractérisation fonctionnelle des hémocytes d'huître plate. Ostrea edulis, entreprise en cytométrie de flux par le biais de la recherche d'une activité métabolique respiratoire faisant suite à une stimulation n'a pas permis de définir les niveaux de production de peroxyde d'hydrogène pour l'ensemble des animaux analysés. En effet, la variabilité individuelle dans ce cas fait que les réponses d'une huître à l'autre sont très différentes. L'analyse des capacités de phagocytose de billes de latex fluorescentes permet quant à elle de définir sans difficulté en cytométrie de flux des pourcentages de cellules à activité phagocytaire.