Biologie moleculaire d'un gene induit par l'ethylene, codant pour une proteine pr

• Auteur / Autrice : YAEL MELLER
• Direction : Michel Dron
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le groupe de proteines pr pathogenesis-related englobe des proteines qui sont synthetisees par la plante en reponse a des stimuli varies tels que l'attaque par un agent pathogene ou l'exposition a des produits chimiques. Le gene prb-1b de nicotiana tabacum code pour une proteine pr-1 de type basique. Son expression est induite par l'ethylene de facon rapide au niveau transcriptionnel, independamment du stade de developpement. Pour cette raison, l'expression du gene prb-1b offre un modele adequat a l'elucidation de mecanismes specifiques de regulation transcriptionnelle. L'analyse de deletions dans des plantes transgeniques de tabac a permis la caracterisation d'un element promoteur minimal apte a promouvoir l'induction par l'ethylene. Des sequences promotrices contenant 213 pb au moins se sont revelees suffisantes a l'augmentation par un facteur de 20 de l'expression du gene reporteur dans des feuilles de tabac transgeniques exposees a un flux de 20 l/l d'ethylene, alors que 141 pb ne furent pas suffisantes. De multiples interactions adn-proteines, specifiques de sequences et impliquant des extraits nucleaires issus de plantes traitees ou non par l'ethylene, ont ete mises en evidence par gel-retardement sur la region promotrice -863-142. Nous avons par la suite caracterise plus specifiquement les interactions in vitro adn-proteines formees sur l'element promoteur -237-143. Deux sites d'interactions ont ete mis en evidence et identifies comme les sequences contigues g (-200-178) et y (-179-154). Les facteurs interagissant furent caracterises comme deux activites distinctes fractionnees de facon differentielle par chromatographie sur colonne d'heparine agarose