Clonage du locus du syndrome du retard mental avec x fragile et caracterisation d'un nouveau mecanisme de mutation

Cloning of the locus corresponding to the fragile x mental retardation syndrome and characterization of a novel mutation mechanism

• Auteur / Autrice : DOMINIQUE HEITZ
• Direction : Jean-Louis Mandel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Strasbourg 1

Résumé

Le syndrome de retard mental avec x fragile est la plus frequente cause de retard mental hereditaire, et est associe a l'expression cytogenetique d'un site fragile chromosomique situe en xq27. 3. La recherche du gene responsable de cette maladie, debutee en 1983, mettait en uvre des analyses de liaison genetique. La poursuite de cette cartographie necessitant l'isolement de nouveaux marqueurs, j'ai analyse plus de 50 clones provenant du chromosome x. Ce travail m'a permis d'isoler une sonde grace a laquelle nous avons pu observer des anomalies de methylation de l'adn chez des patients atteints du x fragile. Deux chromosomes artificiels de levure ont ensuite ete obtenus, qui se sont reveles contenir le site fragile en xq27. 3 ainsi que la region anormalement methylee. A partir de l'un d'eux, j'ai isole des sondes qui detectent ces anomalies de methylation en southern blot, et revelent egalement, chez les patients atteints et les individus porteurs, des augmentations de taille d'un petit fragment d'adn. L'analyse de ce fragment a revele que les mutations impliquees dans le syndrome du x fragile proviennent de l'expansion excessive d'un motif trinucleotidique cgg. Deux types de mutations peuvent etre distingues: la mutation complete, qui confere le phenotype x fragile, et la premutation, qui ne donne pas de retard mental mais qui peut avoir un grand risque de se transformer en mutation complete lorsqu'elle est transmise par une femme. La distinction entre ces deux types de mutations permet un diagnostic prenatal et postnatal fiable qui remplace maintenant avantageusement le diagnostic cytogenetique qui etait pratique auparavant. Ce nouveau type de mutation, baptise mutation par expansion, n'est pas unique au syndrome du x fragile puisqu'il s'est revele etre implique dans deux autres maladies hereditaires