Etude des genes de leghemoglobine chez les legumineuses du genre medicago

A study of the leghemoglobin genes of legumes of the genus medicago

• Auteur / Autrice : Philippe Gallusci
• Direction : David G. Barker
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

Les leghemoglobines sont des hemoproteines tres affines pour l'oxygene, synthetisees dans des organes fixateurs d'azote (appeles nodosite) qui se developpent a la suite de l'association symbiotique entre les legumineuses et les rhizobia. Ces proteines ont un role important dans le fonctionnement des nodosites, car elles assurent le flux d'oxygene necessaire a la respiration des bacteroides a une tres faible pression partielle en oxygene. Les travaux presentes portent sur l'etude des genes de leghemoglobine chez les medicago. Deux adn complementaires correspondant a deux genes de leghemoglobine de luzerne (medicago sativa) ont ete utilises comme sondes specifiques dans des experiences d'hybridation genomique, montrant que les genes de leghemoglobine de medicago sativa et medicago truncatula peuvent etre separes en deux groupes. L'expression de ces deux groupes de genes est regulee de facon similaire pendant le developpement des nodosites de luzerne. Deux genes appartenant a l'un ou l'autre groupe de genes de leghemoglobine de medicago truncatula, choisie comme legumineuse modele au laboratoire, ont ete isoles et sequences. Les cinetiques d'accumulation des arn messagers codes par ces deux genes sont similaires pendant le developpement des nodosites de medicago truncatula. En presence de nitrates qui inhibent la fixation de l'azote, leur expression diminue de facon identique. Utilisant la technique d'hybridation in situ, il a ete possible de determiner au niveau de quelles assises cellulaires des nodosites de medicago truncatula apparaissent les arn messagers leghemoglobine et d'analyser leur repartition dans des nodosites traitees ou non au nitrate. Pour realiser l'analyse fonctionnelle des promoteurs des deux genes de leghemoglobine isoles, des fusions transcriptionnelles ont ete construites entre differentes deletions de ces promoteurs et le gene de la beta-glucuronidase d'esc