Régénération et transformation chez le maïs : essais à partir de microspores isolées

Plant regeneration and transformation in maize: the use of isolated microspores

• Auteur / Autrice : Antoine Gaillard
• Direction : Christian Dumas
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Biotechnologie végétale
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Christian Dumas

Mots clés

Mots clés contrôlés

Androgenèse chez les plantes

Transfert génétique

Pollen

Plantes -- Régénération (biologie)

Maïs

Résumé

L'utilisation des biotechnologies chez les cereales est dependante de la maitrise d'un systeme de regeneration de plantes a partir de cellules isolees. Les techniques d'isolement de microspores mises au point pour differentes cereales permettent d'obtenir des populations de microspores en qualite et en quantite suffisantes pour permettre leur regeneration et realiser des analyses moleculaires. Chez le mais, les conditions de culture conduisant a la regeneration de plantes a partir de ces microspores ont ete definies. Notamment, il a ete trouve que le stade de developpement des microspores, la duree du pretraitement a 7c de la panicule et la densite de culture influencent fortement la production d'embryons. Ce systeme de culture de microspores de mais permet la caracterisation des stades precoces de l'androgenese par differentes approches cytologiques (coloration directe au dapi et au calcofluor, coloration a l'aps sur les coupes semi-fines, et microinjection de colorant fluorescent). Il a ete possible de selectionner des structures embryogenes derivees de microspores qui representent des cibles favorables pour la transformation par microinjection. Des experiences preliminaires de transformation par la biolistique et par microinjection ont ete realisees. La culture de microspores isolees ouvre des perspectives interessantes dans le domaine des biotechnologies et represente un outil de qualite pour une etude moleculaire des mecanismes de l'embryogenese pollinique. Les essais de transformation montrent la faisabilite de transformer les microspores. Ces travaux s'inscrivent dans le cadre general de la comprehension des processus de regeneration et de controle du transfert de genes chez le mais